绿茶类黄酮及其抗肿瘤活性研究-细胞生物学专业毕业论文.docxVIP

山东师范大学硕士论文绿茶类黄酮及其抗肿瘤活性研究 山东师范大学硕士论文 绿茶类黄酮及其抗肿瘤活性研究 中文摘要 茶是继水之后全世界最流行、消费量最大的饮料之一。饮茶已有5000年的历史， 人们也一直认为饮茶有益健康，但对其有效成分的研究却不N30年。目前有效成及 饮茶保健功效的研究正受到广泛的关注。 本研究利用70％乙醇浸提法，从日照绿茶中获得绿茶类黄酮提取物，单波长法 测得提取物中类黄酮含量为21．76％，高效液相色谱法测得提取物中EGCG含量为8．9l ％。利用MTT法、吖啶橙荧光染色、DNA梯度检测等方法对其体外抑制胃癌细胞BGC823 生长及诱导细胞凋亡的作用进行了研究。结果表明，绿茶类黄酮提取物能够诱导细 胞凋亡，剂量依赖性的抑％UBGC823的生长；流式细胞技术研究发现，该提取物处理 的胃癌细胞s期细胞数明显增加，GO／G1和G2／M期细胞明显减少，亚GO／G1期凋亡峰 显著，表明绿茶类黄酮提取物能够通过阻抑细胞周期进程来诱导细胞凋亡；体内S180 荷瘤模型小鼠实验结果表明，绿茶类黄酮能够抑Nslso肉瘤的生长，200mg／kg齐q量 组对S180的生长抑制率达N52．65％；绿茶类黄酮提取物处理组小鼠血清中细胞因子 TNF—n呈上升趋势，提示绿茶类黄酮提取物在体内可能有～定的免疫调节作用。 绿茶类黄酮单体组分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对胃癌细胞BGC823的 生长抑制作用研究表明， EGCG40“g／ml抑制作用与15099／ml绿茶类黄酮提取物的作 用相当。它能够通过诱导细胞凋亡抑制肿瘤细胞的生长。 绿茶类黄酮提取物和EGCG体外对小鼠脾脏细胞增殖实验表明，二者不论单独使 用还是与conA一起使用都能刺激小鼠脾脏细胞增殖，而且刺激作用呈现明显的剂量 依赖效应。绿茶类黄酮提取物和EGcG对LPS激活巨噬细胞RAW264．7 NO产生的影响研 究结果表明，二者能够剂量依赖性的降{氐LPS激活巨噬细胞RAW264．7NO的产量。 关键词：绿茶；类黄酮：表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)；抗肿瘤；细胞 凋亡 分类号：Q28 山东师范大学硕士论文Flavonoids 山东师范大学硕士论文 Flavonoids of Green Tea and its Antitumor Effect ABSTRACT Tea is ode of the most widely consumed beverages in the world，next only to water．It has been 5000 years since the appearance of tea and its healthy benefits have also been recognised，but the history of researches on the assotiation of its components and its positive activities is of no more than 30 years．There are growing interests in the green tea for its healthy effects． In this experiment，70％ethanol was used to get the extraction of green tea and the content of flavonoids in the extraction determined by spectrometry is 2 1．76％，while the EGCG in the extraction is 8．91％determined by high performance liquid chromatogram．In vitro，MTT assay，acridine orange(AO)fluorescence stainning，Flow CytoMetry(FCM)， and DNA ladder assay were used to study the abilities ofthe 6xtmction to inhibit the growth and induce the apoptosis of gastric cancer cell line BGC823．The result ofMTT showed that green tea extraction could suppress the proliferation of BGC823 in a dose--dependent manner．BGC823 cells stained with acridine orang