慢性乙型肝炎患者肝内趋化因子rantes及外周血单核细胞toll样受体2（tlr2），4（tlr4）的变化-内科学专业毕业论文.docxVIP

在病毒性肝炎的发病过程中也起着重要的作用，慢性丙型肝炎患者肝组织内的趋 在病毒性肝炎的发病过程中也起着重要的作用，慢性丙型肝炎患者肝组织内的趋 化因子RANTES水平与炎症细胞的浸润程度及肝脏炎症程度有关，Duan等的研究 表明慢性乙型肝炎患者血清RANTES水平较正常对照组显著升高，但他们未曾对 血清RANTES水平或肝组织内RANTES水平与肝脏炎症程度进行具体的相关性研 究，因而两者间的具体相互关系尚难以确定，值得深入研究。 Toll样受体(Tol卜1ike receptors，TLRs)是新近发现的天然免疫受体， 现已发现，TLRs至少存在10个成员(TLRl～10)，它们可以通过模式识别 (Pattern recognition，PR)方式识别病原体相关分子模式(Pathogen associated molecular patterns，PAMPs)，激活天然免疫细胞等多种细胞，最 终产生一系列的生物反应。其中Toll样受体2(Toll-like receptor 2，TLR2) 和Toll样受体4(Toll—like receptor 4，TLR4)分布广泛，主要表达于单核细 胞、巨噬细胞、树突状细胞、多形核细胞等天然免疫细胞：它们的识别谱广、生 物学作用广泛，主要包括抵抗感染，引发炎症反应和促进抗原呈递细胞的成熟、 调控获得性免疫反应。近年来已经有大量的研究证实在诸如丙型肝炎、类风湿性 关节炎、全身炎症反应综合征等多种炎症性疾病中存在有外周血单核细胞表面 TLR2和／或TLRA的表达升高，并且TLR2和／或TLR4在上述炎症反应过程中具 有重要的作用。HBV核衣壳的核心抗原成分通过其富含精氨酸的片段与人巨噬细 胞细胞膜上的硫酸乙酰肝素成分结合后，可以激活TLR2信号通路，使NF—kappaB 活化，导致TNF一Ⅱ及IL一6等的分泌，另外TLR2还可被热休克蛋白70(HSP70)、 坏死细胞、凋亡细胞所激活；TLR4则可以被内毒素、热休克蛋白60(HSP60)、 凋亡细胞等信号所激活，导致TNF一Ⅱ及IL一6等的炎症介质的分泌。在慢性乙型 肝炎患者体内存在有上述的TLR2和TLR4信号刺激成分，因而有必要研究在慢性 乙型肝炎患者TLR2和TLR4是否可能参与炎症介质的释放、是否与炎症反应相关， 而TLR2和TLR4表达水平是否有改变也值得探讨，但目前尚未见到相关的报道。 本课题研究的目的：(1)对慢性乙型肝炎患者肝脏内趋化因子P,ANTES表达及 其与肝脏炎症程度的关系进行研究，探讨肝脏内趋化因子RANTES在慢性乙型肝 炎中的意义。(2)对慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者外周血的单核细胞表 面TLR2和TLR4的表达水平进行研究，并对它们与血清TNF—o水平进行相关性 分析，初步研究TLR2和TLR4的表达水平变化是否可能与肝脏炎症有关。 1．慢性乙型肝炎患者肝脏内趋化因子RANTES水平与肝脏炎症程度的关系 1．慢性乙型肝炎患者肝脏内趋化因子RANTES水平与肝脏炎症程度的关系 研究方法：共采用无其它合并症的慢性乙型肝炎患者64例和肝移植健康供体10 例的肝组织，肝组织行常规HE染色病理检查，并根据炎症分级分组。用免疫组织 化学染色(MAXVISIONTM两步染色法)对肝组织RANTES的表达进行研究； 所有标本均先在光学显微镜下观察阳性表达特点，进行定性研究；然后用计算机 辅助图像分析系统对RANTES免疫组织化学染色标本进行定量检测，student-t test法比较正常对照和慢性乙型肝炎患者肝组织RANTES表达的差异；单因素方 差分析及Scheffe检验比较不同炎症分级患者间RANTES表达的差异，PO．05 为有统计学意义。 研究结果：本研究发现正常人肝组织RANTES只在少量肝细胞中散在表达，为胞 浆显色阳性，呈浅棕色，染色较弱；慢性乙型肝炎患者肝组织RANTES也主要在 肝细胞中表达，也为胞浆显色阳性，呈深棕色，与正常人比较，其肝组织中RANTES 显色阳性的肝细胞数目显著增多且染色较深。64例慢性乙型肝炎患者肝组织 RANTES表达值为25．9±11．9阳性单位值，10例正常对照患者肝组织RANTES 表达值为3．7±1．5阳性单位值，慢性乙型肝炎患者肝组织RANTES表达较正常 对照组显著增强(P0．05)。15例Gl级、20例G2级、17例G3级和12例G4级 慢性乙型肝炎患者肝组织RANTES表达分别为15．0±5．7、21．6±5．9、30．3± 8．2、40．9±12．3阳性单位值，自G1到G4级，随着肝组织炎症分级的增加，肝 组织RANTES的表达逐级增强，各组病例间的比较均具有显著性差异(Po．05)。 2．慢性乙型肝炎患者和慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞TLR