蒙古黄芪的组织培养-植物学专业毕业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 I I 摘 要 黄芪（Radix Astragali）是豆科（Leguminosae）蝶形花亚科（Papilionoideae） 多年生草本植物，具有很高的药用价值和经济价值。但由于近年来的过度采挖，致 使野生黄芪资源几近枯竭，不能满足市场的需要，所以离体培养已成为增加黄芪产 量的主要手段之一。本文以购自甘肃省陇西县的优质蒙古黄芪种子为材料，通过组 织培养的方法建立其快速繁殖体系。 蒙古黄芪快速繁殖体系的建立，主要是针对种子的消毒和萌发、外植体的筛选、 愈伤组织初代诱导培养基、继代增殖培养基和生根培养基的选择，以及褐化现象的 抑制进行的。 种子的消毒和萌发率的高低对于无菌条件下获得外植体是很重要的。将蒙古黄 芪种子浸泡在适量洗洁精 10min 中后，再依次进行 45s 中 75％的酒精浸泡和 9.5min0.1%的升汞消毒，其萌发率可达 100%，且不发生任何污染现象；另外，在低 温中存放半年和一年后的种子若经过萌发前蒸馏水中 10h 的浸泡预处理，其萌发率 可有大幅度提高，达到 100%。 分别以蒙古黄芪的子叶、下胚轴和胚根作为外植体诱导愈伤组织。结果发现， 在分别添加了 NAA、2,4-D 及 6-BA 的单一植物激素的 MS 培养基中，子叶均不能 诱导出愈伤组织，而下胚轴在 NAA 为 1.0mg/L 时诱导率可达 70%；在添加了不同 生长素和细胞分裂素组合的培养基中，子叶诱导的愈伤组织褐化程度较轻，但诱导 率均较低，而胚根的诱导率虽高于子叶，但褐化严重，只有下胚轴的诱导率最高， 可达 100%，虽仍有褐化现象发生但生长旺盛。所以，下胚轴是诱导蒙古黄芪愈伤 组织的最佳外植体。 培养基中的激素种类与浓度配比是影响蒙古黄芪初代培养、继代增殖及生根培 养的重要因素。其中，愈伤组织的最 佳初代诱导培养基是： MS+0.5 或 1.0mg/L6-BA+0.15mg/L NAA。在此激素中，愈伤组织诱导率可达到 100%；而继代 中仍可以此浓度来进行增殖培养，这样不仅可使愈伤组织达到较好的生长效果而且 还具有较高的增殖量。另外，在继代培养时愈伤组织易发生褐化，当用单一防褐剂 对其进行抑制时，活性炭（AC）的作用不明显，而一定浓度的 Vc 对愈伤组织的褐 化则起到了较明显的抑制效果；因而进一步通过正交试验对综合因素抑制褐化的效 果做了对比，得出当培养基中添加 0.1mg/L Vc，前 3 天进行暗培养，其余几天进行 光培养(10h/d) ，10 天后继代时，其褐化得到了较好的控制。在生根培养中， 1/2MS+2.0mg/L NAA 为最适生根培养基，其中诱导生根率可达到 83.3%，若再向培 II II 养基中添加 0.3%的活性炭（AC）时，则生根数量更多。 通过对蒙古黄芪愈伤组织总的生长趋势进行测定，发现即使按照所有筛选出的 最适条件进行培养，愈伤组织的最佳生长旺盛期（即具有最大的增殖率、最佳的生 长状态并无褐化现象的发生）只能稳定在 3、4 代左右，若继续进行增殖培养，则长 势逐渐变缓，且伴有褐化现象的发生。 关键词：蒙古黄芪；组织培养；愈伤组织；褐化抑制 英文摘要 英文摘要 PAGE PAGE IV Abstract Radix Astragali is perennial herb of Leguminosae Papilionoideae plants, with high medicinal values and economic values. Recently, the number of wild plant resourses have become reduced, which can not meet the need of the market because of the excessive collection. Therefore, the rapid propagation has become one of the major messures to increase the quantity. The seeds of Radix Astragali selected from Longxi in Gansu province are used to establish the rapid propagation system in this paper. The steps of the establishment of rapid propagation system contained the sterilization and germination of seeds, the selection of explants, and the selections