脉红螺人工苗种繁育与微卫星标记筛选-水产养殖专业毕业论文.docxVIP

脉红螺人工苗 脉红螺人工苗革中繁育与微卫星标记筛选 万 万方数据 冒 独创声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知 ，除了文中特别加以标注和致谢的地方外 ，论文中不包含其 他人 己 经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得 (注:在日没有其他需要特别声明的 ，本栏可字〉或其他教育机构的学位或证书使 用过的材料。与我 一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文 中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名 :应饭 签字叫I P 年 5月 51 日 ………………一……--一-一一一一-一一一-……-一一…·一-- 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使 用学位论文的规定，并同意 以下 事项: 1、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘 ，允许 论文被查阅和借阅。 2、学校可以将学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进 行检索，可以 来用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学中 国学术期刊(光盘版)电子杂志社用于出版和编入 CNKI ((中国知识资源总库))， 授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库. (保密的学位论文在解密后适 用本授权书〉 学位论文作者签名: 部主及 导师韩茶 房 签字日期 :VOI千 年 主 月 王1日 签字日期 :ν{f年 5 月毛|自 IV 脉红螺人工苗种繁育与微卫星标记筛选 脉红螺人工苗种繁育与微卫星标记筛选 脉红螺人工苗种繁育与微卫星标记筛选 摘 要 脉红螺(Rapana venosa)隶属软体动物门 (Mollusca)、腹足纲(Gastropoda)、骨 螺科(Muricidae)、红螺属(Rapana)，是一种海洋底栖大型肉食性贝类，主要分布 在亚洲的中国、日本和韩国沿海，自从上世纪 40 年代起开始逐步传遍世界各地。 在我国，脉红螺是传统的海珍品，近年来，随着环境的污染，人为的过度捕捞， 自然资源严重衰退。 近年来，脉红螺人工养殖技术研究已经开展相关工作。目前，关于脉红螺的 育苗研究仍处于探索阶段，育苗技术有待进一步完善与优化。微卫星多态性高、 呈共显性遗传等优点受到实验者的青睐，是遗传育种、生物资源家系分析、系统 发生和种群遗传学多样性研究的探针工具。对于脉红螺微卫星的开发一直处于空 白状态，目前，仍旧没有研究关于脉红螺微卫星的开发分析的报道。本研究开展 的主要内容如下： 1.脉红螺人工育苗技术研究 通过本实验探究脉红螺摄食喜好性，为脉红螺亲体培育选择最佳饵料。饵料 是亲贝的促熟培育的基础，实验中需要投喂喜食饵料进行促熟，在脉红螺亲体正 常摄食情况下，使用 10 种活体饵料作为对比，探究脉红螺摄食喜好，并从成本 和取材考虑，进行 4 种贝类实验。养成实验结果是四角蛤蜊和中国蛤蜊最好，紫 贻贝次之，缢蛏最差，成活率最低。 比较了脉红螺卵袋大小与卵子个数的关系，本实验过程中，收集的卵袋平均 长度为 19.80mm，平均宽度为 2.85mm，长和宽的平均比例为 7.10，平均每个卵 袋中含有受精卵达 1304 粒。 观察了不同时期脉红螺幼虫生长发育的特征，从受精卵卵裂开始观察，分别 描述了多细胞期，囊胚期，担轮幼虫，面盘幼虫，浮游期幼虫，以及附着后稚螺 的形态特征。各个不同发育阶段温度、盐度以及饵料的数据为脉红螺的工厂化育 苗提供数据参考。 研究了脉红螺幼虫附着变态过程中附着基的选择。在附着变态阶段，通过实 验筛选，最终选择附有底栖硅藻的波纹板作为幼虫的附着基。变态过程中的适宜 V 动物性饵料，通过采用牡蛎软体部、四角蛤蜊软体部、日本蟳肉、底栖硅藻、牡 蛎稚贝 5 种不同的饵料进行实验，结果表明在附着牡蛎稚贝的波纹板上脉红螺的 附苗量最多。 研究了不同浓度金属离子处理对幼虫附着的影响，实验过程中对脉红螺幼虫 用 5 个不同的浓度梯度的 KCl 溶液分别处理不同时间，观察幼虫附着变态的影 响。经过筛选优化，结果为 18?10-3mol/L 的 KCl 处理脉红螺浮游幼虫 10 小时效 果最佳。 研究结果基本解决了幼虫附着变态食性转化的难题，为脉红螺的工厂化育苗 提供了参考资料。 2.脉红螺微卫星标记的开发 本实验采集山东青岛沿岸脉红螺野生个体作为实验材料，首先采用磁珠富集 法和生物素标记的(CA)15 和(CT)15 寡核苷酸探针，构建了脉红螺微卫星部分基因 组富集文库，从中设计筛选出 23 个多态的微卫星标记。23 条微卫星的观测杂合 度是从 0.167 到 1.000，平均值为 0.645；而期望杂合度为从 0.455 到 0.924，平 均值为 0.696。这些微卫星标记为脉红螺种质资源保护及繁殖生物学研究提供重 要的遗传学工具