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石河于大学学位论文撞倒性声明及使用授权声明
学位论文维创性声明
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摘要
目的:本研究以枯草芽孢杆菌为试验菌,对发酵棉粕饲料中消化酶(植酸酶、蛋白酶、淀粉酶、 纤维素酶)活性及营养成分变化进行研究。采用 4 因子 4 水平正交设计,以发酵底物中消化酶活性 为指标,优化底物中 K+、Na+、Ca2+、Mg2+四种离子无机盐的添加量。本论文还探究了发酵棉粕在 不同的干燥方法和干燥时间、不同的包装及储存时间对消化酶活性的影响,同时对其进行营养价值 评定,为生产优质生物发酵饲料奠定基础。本研究的目的是将枯草芽孢杆菌产酶的特性与新疆的棉 粕资源相结合,开发棉粕源枯草芽孢杆菌发酵饲料,为发酵饲料的加工处理提供理论依据。
方法:本论文由五个试验组成。试验一:以枯草芽孢杆菌为研究对象,嗜酸乳杆菌、热带假丝酵 母为参考对照,在相同的发酵条件下进行发酵,比较发酵产物中消化酶(植酸酶、蛋白酶、淀粉酶、 纤维素酶)的活性及营养成分变化。试验二:采用 4 因子 4 水平正交设计,以 MgCl2(0.1 %、0.2 %、 0.3 %、0.4 %)、CaCl2(0.25 %、0.5 %、0.75 %、1 %)、KCl(0.1 %、0.2 %、0.3 %、0.4 %)、NaCl
(0.2 %、0.4 %、0.6 %、0.8 %)的添加量添加到发酵底物中,共 16 个处理,测定不同处理发酵产
物中消化酶活性,经正交方差分析得到 MgCl2、CaCl2、KCl、NaCl 四种无机盐在底物中的最适添加 量。试验三:依据试验二的研究结果,获得棉粕源枯草芽孢杆菌发酵饲料,将发酵产物分别以普通 干燥和真空冷冻干燥方法进行干燥,普通干燥以干燥温度(40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、 70℃)、干燥时间(24 h、48 h、72 h)进行处理,共 21 个处理,比较消化酶的活性随着温度和时间 的变化,确定最适的干燥方式。试验四:将烘干后的发酵产物分别采用普通包装和真空包装两种方 法进行包装,放置时间设 10 d、20 d、30 d、40 d、50 d、60 d 六个梯度,测定各放置时间段消化酶 活性的变化,选出酶活性高的包装储存方法。试验五:根据以上试验结果,制备优质棉粕源枯草芽 孢杆菌发酵饲料,测定发酵前后饲料中植酸、小肽、纤维素含量,综合评定发酵产物的营养价值。
结果:试验一:由枯草芽孢杆菌 Z3、嗜酸乳杆菌 S1、热带假丝酵母 ZD-3 分别发酵棉粕饲料, 结果表明,(1)酶活性:Z3 与 S1 均可产植酸酶,ZD-3 不产植酸酶,且 Z3 组的植酸酶活性最高; 三株菌株均产蛋白酶,且 Z3 组的酶活性最高;三株菌株均产淀粉酶,且 ZD-3 组酶活性最高;仅 Z3 组产纤维素酶;(2)营养成分:三株菌株发酵后,饲料中 CP、EE、Ca、P 含量较空白对照组均有不 同程度的提高,Ash、NDF 含量较空白对照组降低。Z3 组 CP、EE、Ca、P 含量最高;Z3 组 NDF 含量最低,ZD-3 组 Ash 含量最低,且均与其他组差异极显著(P 0.01)。综合考虑,枯草芽孢杆菌 Z3 发酵棉粕产酶种类最多,且能较好地改善饲料品质,发酵效果最好。
试验二:底物中各无机盐的添加量为 MgCl2:0.2 %、CaCl2:0.5 %、KCl:0.3 %、NaCl:0.2 %
时,各种酶的活性均能达到较高水平。此时植酸酶活性为 73.82 U/g,蛋白酶活性为 57.4 U/g,淀粉
酶活性为 50.46 U/g,纤维素酶活性为 5.09 U/g。 试验三:在普通干燥条件下,植酸酶、淀粉酶、纤维素酶在 40℃、24h 时活性最高,蛋白酶 45℃、
24h 时活性最高;真空冷冻干燥条件下,植酸酶、蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶活性分别为:87.49 U/
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