血液及唾液蛋白指纹图谱在口腔颌面恶性肿瘤诊断中的应用研究.doc

华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 have detected 148 protein peaks including 6 protein peaks which have significant difference between oral malignant tumors and the benign tumor control by analyzing saliva samples. The sensitivity and specificity of the detective model which differentiate malignant tumors from the benign control were 81.0% and 90.3% respectively. Conclusion：Plasma and saliva protein fingerprint models are novel effective screening diagnosis method for oral and maxillofacial malignant tumor. Our discriminative model could distinguish malignant tumors between the benign tumor controls with encourage sensitivity and specificity. Potentially, it could be used for early diagnosis of oral and maxillofacial malignant tumors in the future. Keywords: Oral and Maxillofacial Malignant Tumors; SELDI-TOF-MS; Biomarkers; OSCC; Diagnosis model; Saliva Proteomes 5 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 SELDI-TOF-MS 在口腔恶性肿瘤患者血液及唾液 蛋白质学分析中的应用研究 前 言 口腔颌面部恶性肿瘤是头颈部常见恶性肿瘤，它与口咽癌一起位列全身恶性肿瘤第 6 位，其中鳞状上皮细胞癌约占 90%；在一些高发地区, 每年新增病例甚至占男性恶性肿瘤的 25%[1]。口腔癌的治疗往往给患者带来重要功能的丧失,包括语言不清、吞咽困难、进食障碍 等,以及面部容貌的改变,影响患者的生存质量。口腔癌的危险因素多种多样,其中吸烟时间越 长、吸烟量越大,危险度越高(OR 分别为 3.57、4.78)[2]。近五十年来，尽管随着外科学、放 疗及化疗医学的进步，世界范围内口腔癌患者的五年生存率并无显著改善，仍然低于 50%[3-5]。这可能与大多数癌症发现比较晚，缺乏相应的早期癌症标志物有关。由于早期的 口腔癌及癌前病变多数无明显临床症状，患者就诊时多为中晚期，错过最佳治疗时机。研 究表明口腔鳞状细胞癌若在 T-1 stage 被发现，其 5 年治愈率可达到 80%；若在 T-2 stage 被 发现，5 年治愈率达 60%；而 T-3 和 T-4 stage 的 5 年治癒率只有 20－40%。恶性肿瘤的早 检测意味着更高的长期生存率。为提高患者的生存率，找到一种特异性高、敏感性高的检 查手段，提高口腔早期癌的检出率是重要课题。肿瘤的形成是多因素参与的缓慢复杂的多 阶段演进过程，致癌因素共同作用导致局部组织细胞基因层面发生改变，失去对生长的正 常调控，使编码的蛋白发生异常，细胞异型增生导致肿瘤发生。蛋白质组学从细胞水平研 究蛋白质的组成以及变化规律。比较蛋白质组学是检测并对比患病人群和正常人群体液中 存在的差异蛋白，为寻找用于肿瘤早期筛查的肿瘤标志物奠定基础。 人的体液携带大量蛋白质和遗传物质，使用血液作为诊断体液，通过高通量生物质谱技 术研究疾病状态下血液的蛋白质组学、寻找疾病标志物已经得到广泛研究[6-7]。唾液作为检 测工具与血液相比具有安全，无创，数量充足可持续获取的优势，适用于庞大的群体的筛 查。多项研究已在唾液中鉴定出多种口腔癌标志物，一部分标志物同时存在于血液中[8]-[9]， 如何验证并区别真假标志物十分重要,。 表面增强激光解析电离飞行时间质谱（surface-enhanced laseresorption/inionation time of flight mass spectrome-ry,SELDI-TOF-MS）是近年来发展起来的一种蛋白质组学研究技术， 6 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 它将蛋白质芯片技术与质谱技术相结合，通过引入基质分子，使待测