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活血止痛合剂的薄层鉴别研究 【摘要】 　　目的建立活血止痛合剂的薄层色谱鉴别方法。方法采用薄层色谱法鉴别处方中投料量较大的5味药。结果处方中的红花、大黄、当归、赤芍、金银花的薄层色谱具有鉴别特征，且重现性好。结论薄层色谱法鉴别方法简便可靠，专属性强，可作为活血止痛合剂的质控指标。  【关键词】 活血止痛合剂 薄层色谱 红花 大黄 当归 赤芍 金银花  活血止痛合剂是我 医院 的固定处方制剂，由红花、川牛膝、大黄、防风、当归、柴胡、赤芍、金银花、川芎、乌药、桂枝等组成；其中当归、金银花、川芎、乌药等用水蒸气蒸馏提取挥发油，其余药味加水煎煮，滤过，取滤液与挥发油混匀，分装、灭菌即得；具有活血清淤，理气止痛的功能；临床上用于跌打损伤，新伤初期，淤血作痛等症，疗效好。本文用薄层色谱法鉴别了处方中所含的红花、大黄、当归、赤芍、金银花。现报道如下。  1 仪器与试药  仪器AL104型分析天平，HH恒温水浴锅，202－1AB型恒温干燥箱，Model C3860型超声仪80－1型离心机 ，KDM型控温电热套ZF-I型三用紫外分析仪。 　　　　 试药甲醇，无水乙醇、三氯甲烷、石油醚、氨水、正丁醇、丙酮等，以上均为分析纯。薄层层析硅胶G化学纯红花对照药材、芍药苷对照品、大黄素对照品、绿原酸对照品、当归对照药材(批号0927-9705)均购自 中国 药品生物制品检定所。 方法与结果  .1 红花的薄层色谱鉴别［1］取本品10 ml，用石油醚振摇提取两次，1ml/次，弃去石油醚液，水溶液水浴蒸干，残渣加80%丙酮溶液1 ml使溶解，作为供试品溶液。取红花空白对照样品10 ml，同法制成红花空白对照样品溶液。另取红花对照药材1 g，加80%丙酮溶液10 ml，密塞，振摇1min，过滤，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》XX年版Ⅰ部附录ⅥB)试验，吸取上述3种溶液各μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-水-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品无干扰。结果见图1。  .2 当归的薄层色谱鉴别［2］取本品10 ml，加乙醚振摇提取两次，20 ml/次，合并乙醚提取液，挥干，残渣加乙醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。取当归空白对照样品10 ml，同法制成当归空白对照样品溶液。另取当归对照药材，加乙醚20 ml，超声1min，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇1 ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各10 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷－醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性样品无干扰。结果见图2。  图1 活血止痛合剂中红花的TLC图  图2 活血止痛合剂中当归的TLC图  　　 大黄的薄层色谱鉴别［3］ 取鉴别“”项下备用的水溶液，水浴加热除去残留乙醚，加水ml，加盐酸1 ml，置热水浴中加热30 min，立即冷却，用乙醚提取两次，10 ml/次,合并乙醚提取液，挥干，残渣加醋酸乙酯1 ml使溶解，作为供试品溶液。取大黄空白对照样品10 ml，同法制成大黄空白对照样品溶液。另取大黄对照药材1 g，加乙醇30 ml加热回流30 min，滤过，滤液蒸干，同法制成对照药材溶液。再取大黄素对照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述4种溶液各μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯－甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的橙色荧光斑点；置氨蒸气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。阴性样品无干扰。结果见图3。 图3 活血止痛合剂中大黄的TLC图  .4 金银花的薄层色谱鉴别［3］取本品10 ml,用乙醚振摇提取两次，1ml/次,弃去乙醚提取液，水溶液水浴加热挥去残留乙醚，加稀盐酸调节pH值至1～2，离心min，分取上清液，加醋酸乙酯2ml振摇提取，分取醋酸乙酯溶液，蒸干，残渣加醋酸乙酯1 ml使溶解，作为供试品溶液。取金银花空白对照样品10 ml，同法制成金银花空白对照样品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各1～μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，