脑脊液常规检查标准操作规程.docVIP

脑脊液常规检查标准操作规程 一.目的：规范脑脊液常规 检查。 二.适用范围：适用于本科室的脑脊液常规检查。 三.支持性文件：全国 临床 检验操作规程第三版 四.原理：球蛋白定性：潘氏试验。 五.仪器：OLYMPUS H20光学显微镜。细胞计数板。 六.试剂： 5%的苯酚溶液：取纯苯酚25ml，加蒸馏水至500ml，用力振摇，置37oC温箱内1-2天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存；1%冰醋酸。 七.样本要求：临床 医生腰穿后取脑脊液于干净的试管中,注明 患者姓名,立即送检。 八.操作步骤： 1.一般性状检查：主要观察颜色（无色、白色、红色、黄色、绿色、黑色等），透明度（透明、微浑、浑浊、脓样等），凝块（无、有或薄膜形成）。 2.潘氏定性试验：取潘氏试剂2至3ml，置试管中，滴入脑脊液1-2滴，衬以黑色背景，立即观察结果。 结果判断:阴性：清晰透明，不显雾状。 极弱阳性(土)；微呈白雾状，在黑色背景下，才能看到。 弱阳性(+)：灰白色云雾状。 阳性(2+)：白色浑浊。 强阳性(3+)：白色浓絮状沉淀。 最强阳性(4+)：白色凝块。 3.细胞总数：澄清的脑脊液混匀后直接滴入计数池内，计数10个大方格内的细胞数。细胞数/L=10个大方格内的细胞数*106。混浊 或带血的标本可取标本20μl，加入含有 红细胞稀释液0.38ml的小试管内,混匀后滴入计数池内,低倍镜下计数4个大方格内的细胞数。细胞数/L=四个大方格内的细胞数×50×106。 4.白细胞数：非血性标本：于小试管内滴入冰醋酸1-2滴，转动试管，使壁内沾有冰醋酸后倾去，滴入标本3-4滴，数分钟后充入计数池计数，计数四个大方格内的白细胞数。白细胞数/L=四个大方格内的白细胞数×50×106.血性标本用1%的冰醋酸稀释后计数，并用以下公式校正：每升中白细胞数=每升中白细胞末校正数-每升中红细胞数×每升血液中白细胞数/每升血液中红细胞数。 5.细胞分类（计数50/L时）：白细胞计数后，将低倍镜换为高倍镜，直接在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞，应数100个白细胞，并以百分率表示。若白细胞少于100个，应直接写出单核、多核细胞的具体数字。若白细胞少于100个应直接写出具体数字。如有可疑肿瘤细胞应送检病理科。 九.参考范围： 1.外观：无色、透明、不凝固。 2.潘氏试验：阴性。 3.正常人脑脊液中无红细胞，仅有少量白细胞。 成人：(0-8)×106/L儿童：(0一15)×106/L 十.注意事项： 1.标本及时送检，收到标本后应立即检验。久置会使细胞破坏，葡萄糖分解，病原菌破坏或溶解。 2.潘氏试验不仅针对球蛋白。 3.细胞计数应及时进行，以免脑脊液凝固，使结果不准确。 4.细胞计数时，应注意新型隐球菌与白细胞的区别。前者不溶于乙酸，加优质墨汁后可见不着色的荚膜。 5.计数池用后，应用75％乙醇消毒60min。忌用苯酚消毒，因有损计数池的刻度。 6.如标本为血性，为区别蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤，应注意：(1)将血性脑脊液试管离心沉淀(1500r／min)，如上层液体呈黄色，隐血试验阳性，多为蛛网膜下腔出血，且出血的时间已超过4h。如上层液体澄清无色，红细胞均沉管底，多为穿刺损伤或因病变所致的新鲜出血。 7.潘氏试验在操作时如发现标本浑浊时，应先将标本离心，再取上清液作试验。同时试管等器材必须清洁，否则容易造成本试验假阳性。