三种黄鳝RAPD标记和遗传多样性分析-养殖专业论文.docxVIP

摘要本文应用随机扩增多态D1qA(ItAPD)技术对黄鳝属(^如nDp陀Ⅲf)中产自缅甸 摘要 本文应用随机扩增多态D1qA(ItAPD)技术对黄鳝属(^如nDp陀Ⅲf)中产自缅甸 的山黄鳍CM cw^缸)，印度尼西亚的穴黄鳝(M如船Drfz蜉)，及中国的黄鳝(M 口舾“n，共12个个体基因组DNA的遗传标记进行分析。先用12个个体的混合 DNA对OPA、OPB和OPD三个系列40个随机引物进行筛选，有35个引物获 得了扩增谱带，30个引物获得了重复性良好的谱带。本试验选用筛选出的30个 引物分别对三种黄鳝的12个个体核DNA进行PcR扩增，其扩增产物经琼脂糖 凝胶电泳分离后，共获得315个扩增片段，长度为250～5417bp，具有良好的重 复性。每个引物在种问均能扩增出DNA多态性片段，每条扩增条带含有2～16 个大小不等的片段。30个引物均可将1种、2种甚至3种黄鳝分别区别开来。 检出三种黄鳝特异性片段87个，其中Mf船^蛔有25个，M加ssDrf驸有33个， M口舾螂有29个。 从所检测到的位点中，三种黄鳝种群问的多态位点比例(P)为80．32％，遗 传多样性指数(H)为0．157 5；种群内的多态位点比例和遗传多样性指数在M 口舾驸中为33．53％、O．080 1：在膨c“c矗砌中为48．61％、O．064 5，在^z，嘶Jorf“s 中为44．88盼、0．138 O。结果表明。种群间和种群内都具有较高的遗传变异，种 群间的遗传变异高于种群内的。 通过DPs2003种群遗传分析软件包计算显示：M c“如妇个体间遗传距离(D) 最小为O．450 5、最大为O．835 6，平均为0．584 2；M正埘D，ms个体间遗传距离最 小为O．140 O、最大为O．904 8．平均为0．525 0：M n舾m个体间遗传距离最小为 O．250 O、最大为0．764 7，平均为O．529 3。M口f6姗与M向鼬Drf淞的遗传距离最 大，为o．741 5；M c“拍胁与M佑s舳rfm的遗传距离次之，为O．703 5：膨c村c自晒 与M甜6淞的遗传距离最小，为0．686 0。根据遗传距离指数，用UPGMA方法 进行聚类分析，构建了三种黄鳝亲缘关系聚类图i图中所示三种黄鳝中M c村拍妇 与M口舾淞亲缘关系最近，M加ss甜沁与其余两种相对要远。 关键词：RAI，D标记；遗传多样性：山黄鳝：穴黄鳝：黄鳝 RAPD RAPD markers and their genetic diversi姆 alnong thl℃e speeies of协殍印斑!，’荔珞 珏棼ShunLian Depar蛳ent ofA艄mal Science，Foshan Science a11d Technology College，Nanhai， 52s23l，魏豳鹚鼬g Pro、，ince，p∞ple’s R印浦iic ofe毯na A凝滢RAC下1＆s锄蟮es of thf∞speeies of syn氇ra珏chi fo珏n ecls，硒聪咧嚣淞 c副如胁(HamiloDn，1822)，M扣啪，妇博(Nay龇1952)a11d M口舾埘(Zuiew，793) 粥糟∞ll瞅醛的蕊鞠鼠擎n of My毫藏mar，撕d∞es主基黼d删iang Co猢镪辩潍an Province，cllina respectivel弘 Randomly a拼lplified polymo岫ic DNA (RAPD) 捃c溉i鼋垃e远Ⅸ}曲d毒。鞠融)瑾游壤e s群站i{至c g蹦藤e壬珏鑫}k嚣s鞠d t汝珏窖e狂e曩￡毒Ve羚i锣 of nle wild gr01lper population of fbur individuals觚m each species．The reanions we羚琴瞧瀚《峨n垂94℃，辫罐删糯魏5搬遮，th糯蓬5 eyeles of辨℃ 弛nanmng轴r 1 IIlin，36℃annealing for 1 min and 72℃p01ymerizmg for 2 min； I聚complete ex蛔崩能was∞砖due抛d 8￡72℃蠡)r 7 mh 40嬲m韶s娃OPA，0P8 and OPD were screened，30 primers produced reproducible fingerprints with me molccul皴weight V娜ing f沁m 250酶to 54l 7印。弧e nBmbef of鼬谨D markefs ampl沁cd by each pdmer v撕cd矗Iom 2 to 16．1110∞协terI)re乜Ible p．d啦erns genemd by 30 prim