邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯对斑马鱼胚胎幼鱼HPT轴的干扰影响研究-生物学、生化与分子专业论文.docxVIP

词语缩略表V 词语缩略表 V 万方数据 MEHP MEHP Mono-(2-ethyhexyl)phthalate 邻苯二甲酸单乙基己基酯 3-Aminobenzoic acid ethyl ester or MS．222 甲烷磺酸盐 methane sulfonate salt NIS Sodium／iodide symporter 钠／碘转运体 OD Optical density 光密度 PAEs phthalate acid esters 酞酸酯类 PCNA Proliferating cell nuclear antigen 细胞增殖核抗原 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PPARS Peroxisome prolifemtors activated receptors 过氧化物酶体增殖激活受体 PR Progesterone receptor 孕激素受体 PVC Polyvinyl chloride 聚氯乙烯 TDI Tolerable daily intake 每日摄入限量 TG Thyroglobulin 甲状腺球蛋白 THs Thyroid hormones 甲状腺激素 TRs Thyroid hormone receptors 甲状腺激素受体 TSH Thyroid stimulating hormone 促甲状腺激素 TTR Transthyretin 甲状腺激素转运蛋白 T3 T11riodothyronine 三碘甲状腺激素 T4 Thyroxine 四碘甲状腺激素 UGT Uridiphosphate glucoronosyl transfemses 尿营二磷酸葡萄糖醛酸转移酶 Vtg Vitellogenin 卵黄蛋白原 WHO World health organism 世界卫生组织 VJ 万方数据 目录摘要 目录 摘要 ．I Abstract ． ． ．．III 词语缩略表 ．．V 目录 ．．VII 第一章引言 1 1．1研究背景 1 1．1．1 DEHP概述 l 1．1．2 DEHP的理化性质 2 1．1．3 DEHP的环境降解和体内代谢途径 2 1．1．4 DEHP的用途和限量标准 4 1．1．5 DEHP在环境中的污染 4 1．1．6 DEHP在生物体内中的污染 7 1．1．7 DEHP的毒·陛研究现状 7 1．1．8斑马鱼胚胎模型在毒理学研究中的应用 ．11 1．1．9下丘脑．垂体一甲状腺轴 ．．12 1．2研究意义和实验设计 14 1．2．1研究目的和意义 ．．14 1．2．2实验设计 ．1 5 第二章材料利方法 ．17 2．1试验材料 ．1 7 2．1．1实验用斑马鱼 ．17 2．1．2实验主要试剂 ．1 7 2．1．3主要仪器设备 ．1 8 2．2斑马鱼胚胎的暴露实验 ．．19 2．2．1斑马鱼的饲养和胚胎收集 ．．19 2．2．2预实验确定浓度 ．19 2．2．3正式暴露实验和样品收集 ．1 9 2．3斑马鱼幼鱼生长指标的统计 ．20 2．4甲状腺激素检测 ．20 2．4．1幼鱼全身激素的提取 ．20 2．4．2 ELISA检测斑马鱼幼鱼全身T4含量 20 2．4．3 ELISA检测斑马鱼幼鱼全身T3含量 23 2．5 HPT轴关键基因表达的检测 ．26 2．5．1 RNA的提取 26 2．5．2 cDNA的合成 ．．27 2．5．3实时荧光定量PCR ．28 VII 万方数据 第三章结果 第三章结果 ．3 1 3．1斑马鱼幼鱼生长发育指标 ．31 3．2甲状腺激素全身含量 ．．31 3．3 HPT轴相关基因的表达 ．33 第四章讨论 ．43 4．1 DEHP对斑马鱼生长发育指标的影响 ．．43 4．2 DEHP对斑马鱼HPT轴上基因表达的影响 ．43 4．3 DEHP暴露对斑马鱼幼鱼体内甲状腺激素含量的影响 46 4．4 DEHP毒性研究的展望 ．．46 第五章结论 ．49 参考文献 ．5 l 至5【谓} ．61 攻读学位期间发表的学术论文目录 ．63 独创性声明 ．．65 关于论文使州授权的说明 ．65 VIIl 万方数据 第一章引言第一章引言 第一章引言 第一章引言 1．1研究背景 1．1．1 DEHP概述 酞酸酯(PAEs)是一类人工化合物主要包括邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)、邻苯二甲 酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸--(2一乙基己基)酯(DEHP)、邻苯 二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二辛脂(DOP)等，作为典型的塑化剂来增加塑料的柔 软性和可塑造性，在全球范围内被广泛使用【l】。他们被用于塑料制品如皮革、玩具、建 筑材料、化妆品、油漆和医药等，特别是一些