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冷藏牙鲆中主要腐败菌卯黄抗体的制备及其抑菌性能研究
冷藏牙鲆中主要腐败菌卯黄抗体的制备及其抑菌性能
研究
学位论文完成日期: 指导教师签字: 答辩委员会成员签字:
2
2
独创
独创 声 明
本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其 他人已经发表或撰写过的研究成果, 也不包含未获得
!逵!垫塑查墓丝重要缱型主塑的!奎拦亘窒2或其他教育机构的学位或证书使 用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。
竺噩壁 签字日期:沙J 1年6凡屿日
学位论文作者签
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本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并 向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人 授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息 研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公 众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)
学位论文作者签名: ‘影星灰 导师签字:
签字同期:2。f|年6月f占日 签字日期:p,/年6月圹日
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冷藏牙鲆中主要腐败菌卯黄抗体的制备及其抑菌性能研究捅要
冷藏牙鲆中主要腐败菌卯黄抗体的制备及其抑菌性能研究
捅要
随着人们生活水平的不断提高,水产品的消费量日益增加,对其鲜度要求也 愈来愈高,引起水产品腐败变质的主要原因是细菌的生长代谢,生物保鲜剂由于 其天然、安全、毒副作用小等特点逐渐取代化学保鲜剂而广泛应用于水产食品的 防腐保鲜,壳聚糖、茶多酚、nisin等天然保鲜剂已经被广泛地用于降低鱼肉的 腐败程度。
卵黄免疫球蛋白,又称卵黄抗体,是禽类血清中的IgG进入到卵黄中而形成 的一类免疫球蛋白,其制备简单,适于大规模生产,具有较好的热稳定性和较强 的抗酸碱性、抗离子强度和一定的抗酶解能力,而且卵黄抗体还具有一个非常重 要的性质就是它对其抗原菌的生长具有显著的抑制作用。目前,卵黄抗体已经广 泛应用在免疫诊断检测、动物疾病免疫防治及食品添加剂和化妆品等领域。
本论文以4℃冷藏养殖牙鲆为研究对象,对其货架期终点时的主要腐败菌进 行了定性和定量研究,并以主要腐败菌作为抗原制备4种特异性卵黄抗体,对特 异性卵黄抗体在液体和固体培养条件下的抑菌效果进行比较研究,并在此基础
上,综合感官评定、微生物指标和化学指标(pH、TVBN、TBA)开展IgY抗体 应用于牙鲆样品的抑菌防腐性能研究。主要实验结果如下:
1.根据菌落形态、革兰氏染色、生理生化和营养特性等基本特征,利用 VITEK和BIOLOG细菌鉴定系统,对4C冷藏养殖牙鲆货架期终点时的主要腐 败菌进行分析鉴定,最终确定4℃冷藏货架期终点时养殖牙鲆的优势腐败菌为腐 败希瓦氏菌,占细菌总数的比例约为58.4%。同时存在一定数量的水产食品中常 见的腐败菌假单胞菌属细菌,主要包括荧光假单胞菌、腐臭假单胞菌和边缘假单 胞菌,它们在假单胞菌属中所占的比列依次是63.2%、29.2%、7.6%。
2.以主要腐败菌腐败希瓦氏菌、荧光假单胞菌和腐臭假单胞菌作为抗原制 各4种IgY抗体,4种IgY抗体在液体培养条件下的抑菌结果显示,]gY抗体的
抑菌效率与浓度呈正相关性,浓度越大,抑菌效果越明显。25℃下液体培养8 h,
200 mg/mL的腐败希瓦氏菌IgY抗体(S-IgY)可使腐败希瓦氏菌细胞数量减少
84.7%,荧光假单胞菌IgY抗体(P.IgY)可使荧光假单胞菌细胞数量减少88.1%:
100 mg/mL的混合l lgY抗体(M1-IgY)和混合2 IgY抗体(M2-IgY)分别可
以使腐败希瓦氏菌减少61.6%和67.2%,100
以使腐败希瓦氏菌减少61.6%和67.2%,100 mg/mL的M1·IgY和M2一IgY抗体 分别可以使荧光假单胞菌减少69.2%和77.8%;4℃下液体培养40 h,100 mg/mL 的S-IgY抗体可以使腐败希瓦氏菌菌体细胞的数量减少大约90%,100 mg/mL的 P.IgY抗体可以使荧光假单胞菌菌体细胞的数量减少约66.6%。
3.在固体培养条件下,25℃培养24 h后,100 rag/mE的S-IgY抗体可使腐 败希瓦氏菌细胞数量减少52.38%,P.IgY抗体可使荧光假单胞茵细胞数量减少 62.55%,M1.IgY抗体和M2.IgY抗体对腐败希瓦氏菌的抑制率分别为27.8%和
38.3%,对荧光假单胞菌的抑制率分别为31.1%和40.0%。
4.综合对牙鲆样品的pH、TVB-N值、菌落总
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