两个单基因遗传病家系致病基因的分子遗传学研究-遗传学专业论文.docxVIP

硕士学位论文(polycystin 硕士学位论文 (polycystin 2，PC2)。PKDl突变导致的多囊肾病占全部多囊肾病的85％，剩下的15％ 由PKD2基因上的致病突变导致，而且PKDl突变导致的多囊肾往往比PKD2突变导致 的症状更为严重。此外，多囊肾的症状和严重程度在不同的患者甚至在同一个家系的 不同患者之间往往都有很大的不同，这表明多囊肾的病程可能受其他基因或环境因素 的影响。 Alport综合症(Alport syndrome，AS)也是一种遗传性肾病，发病率至少为 1／50000。它常常在儿童期起病并表现为镜下血尿，随后随着年龄的增长逐渐出现肉 眼血尿、蛋白尿和肾功能不全，并最终在成年期形成肾功能衰竭。部分病人会有肾脏 外的症状，主要包括逐渐的耳聋、视觉障碍。Alport综合症主要由x连锁的COL4A5 基因突变导致(占85％)，为显性致病；剩下的15％由常染色体隐性突变导致。 我们在南方医院发现了一个含有3代人的多囊肾病家系，家系共有5名己知患病 成员，初步考虑此家系为常染色体显性多囊肾病。我们对该家系做了临床分析和相关 的检查，采集了家系成员的DNA样本，并得到了先证者的肾组织样本。通过对先证者 的全基因组二代测序我们得到了其可能致病的PKDl致病突变，此突变为移码突变并 与家系中的患者出现了共分离。同时在家系中发现了一个被注释为致病的COL4A5突 变G953V一一r此基因突变会导致更为严重的alport综合症。 通过对比PKDl基因编码的蛋白PCI在先证者组织和正常组织中的差异，发现病 人的晚期衰竭肾脏中的PCI的表达提高了约1．7倍；组织免疫化学也提示在患者膨大 的小管上皮有明显的表达提高。同时pS6／$6比例的提高和Ki67阳性细胞增多提示了 患者小管上皮处于高增值的状态；但TUNEL实验显示患者的肾脏的凋亡细胞也明显增 多了一一这表明患者的肾脏组织处于一种同时高增殖高凋亡的重构过程。一些机制重 构相关基因的表达量的显著提高也反与晚期肾脏出现的纤维化情况吻合。通过分析家 系中COL4A5突变携带者的临床表现，我们发现此COL4A5突变在家系中并没有导致 alport综合症，同时生物信息学预测也有矛盾的地方；分析报道此突变的文献我们发 现只有一例此COL4A5单独突变致病的患者，患者病情比通常点突变患者的情况严重 很多并且在调查中没有检测此基因的重排。所以，我们认为单独的COL4A5 G953V突 变可能是不致病的。 该家系新的PKDI致病突变的发现，为该家系今后的遗传咨询和产前诊断服务提 供了便利。 III 万方数据 中文摘要第二部分—个脊髓小脑性共济失调家系的致病基因突变分析 中文摘要 第二部分—个脊髓小脑性共济失调家系的致病基因突变分析 脊髓小脑性共济失调(spinocerehenar ataxia，SCAs)，是一类包括多种亚型在 内的神经系统退行性疾病。常见的损害部位包括了从主要的神经系统(小脑、脑干、 脊髓、周围神经等)到神经系统之外的部位(眼、骨骼、心脏等)，临床表现复杂多 样。其主要的临床特征为：初期隐袭起病，走路时步履不稳，肢体摇晃，动作反应迟 缓及准确性变差；中期逐渐发展为说话时发音含糊不清，无法控制音调，眼球转动不 平顺，影像容易产生重叠，肌肉不协调感加重，无法写字，有时感到吞咽困难；晚期 时说话极不清楚，甚至无法语言，肢体乏力，不能站立，需靠轮椅代步，理解能力逐 步下降，最后失去意识，昏睡不醒。影像学检查主要表现为小脑皮质的逐渐萎缩。 SCAs临床表现复杂多样，基因分型是唯一确切有效的分类方法。按遗传方式，SCAs 可以分为常染色体显性、常染色体隐性和x连锁隐性三类。其中以常染色体显性最为 常见，到目前为止，已经有大约35个位点被定位出来，并被分类为3个大的类型：(1) 编码区CAG三核苷酸重复增多导致的多聚谷氨酰胺性共济失调，主要包括SCA3、SCA6 和SCA7；(2)非编码区重复序列增多导致的共济失调；(3)传统突变(移码、错义突 变、无义突变、剪切突变等)和拷贝数变异导致的共济失调。常染色体隐性遗传相对 少见，主要是Freidreich病，在西方人中相对多见，国内罕见。但是即使发现了如 此多的致病基因，仍然有40％左右的SCAs患者找不到致病原因，说明仍然存在未发现 的致病基因，而且几乎每年都有新的致病基因被发现。 我们在珠江医院发现了一个脊髓小脑性共济失调家系，家系中共有4名己知患者 并呈现明显的显性遗传。家系中的患者具有典型的脊髓小脑性共济失调症状，发病年 龄在40岁左右。先证者最初出现不明原因的步行不稳，走路及站立时，身体向双边倒，步行 缓慢，起立困难，随后症状进行性加重。双下肢浅感觉减退，双上肢桡骨膜、肱二、三头肌反射 减弱。