邻苯二甲酸二丁酯对F1代斑马鱼的毒性研究-卫生毒理学专业论文.docxVIP

复旦大学硕士学位论文 复旦大学硕士学位论文 邻苯二甲酸二丁酶对Fl代斑马鱼的毒性研究 邻苯二甲酸二丁酯对Fl代斑马鱼的毒性研究 中文摘要 随着工业的迅速发展，越来越多的化学物随着人类生产和生活排放到环境中， 给人类及其赖以生存的环境带来了隐患。邻苯二甲酸二丁酯(DBP)属于邻苯二甲 酸酯类物质(PAEs)，是一类重要的环境内分泌干扰物(EDCs)，它主要作为塑 料产品的增塑剂和软化剂。近年来，随着塑料垃圾的大量增加，DBP及其它各类PAEs 成为全球性最普遍的污染物之一，其健康危害引起了广泛关注。 本研究探讨了低浓度DBP的生殖发育毒性及远期效应。选用模式生物斑马鱼， 将48对成年斑马鱼随机分为4组：空白对照组、丙酮溶剂对照组、1250“g，L DBP高 剂量组、和625烬／L DBP低剂量组，每组12对。连续暴露于DBP 30天后，将各组的 雌雄鱼交配，孵化出的Fl代斑马鱼在清水中饲养至180dph。将所得Fl代成年斑马鱼 混合自然交配，记录其产卵量、受精率和72h孵化率。为进一步了解DBP暴露分别对 Fl代雄鱼和雌鱼生殖能力的影响，设计与对照组雌／雄鱼分别进行的置换交配实验。 每个DBP处理组的Fl代随机选12条雄鱼与对照组12条雌鱼进行自然交配。同样的置 换也被用于每个DBP处理组的雌鱼，记录其产卵量、受精率和72h孵化率。测量Fl 代斑马鱼身长、体重等生长发育指标，进行性腺的病理组织学检查，同时检测卵黄 蛋白原(VTG)mRNA表达的变化以考察DBP对斑马鱼是否具有雌激素效应。 结果显示，625pg／L DBP处理组F1代斑马鱼平均每缸鱼的产卵数为114．5枚，与 空白对照组和溶剂对照组相比显著减少；1250嵋几处理组的雌鱼产卵极少，每缸小 于10个鱼卵，显著低于空白对照组与溶剂对照组(p0．01)。无论是雌鱼还是雄鱼， 625Ug／L DBP处理组与125099／L的DBP处理组Fi代斑马鱼平均体长均显著低于空白 对照组和溶剂对照组。置换交配试验中，DBP组Fl代雄鱼被对照组Fl代雄鱼代替时 平均每缸产卵数为394±46枚，受精率92±6％，而对照处理组每缸产卵数432±38 枚，受精率为95±8％，两者差异无统计学意义；而DBP组Fl代雌鱼被对照组Fl代雌 鱼代替时，单次交配平均每缸产卵数为56±14个，受精率为36±10％，无论是产卵 数还是受精率与对照组相比差异均有统计学意义。 卵巢组织病理学检查显示，与对照组相比，625州L DBP处理组FI代雌性斑马 鱼卵巢组织中仍可见大量成熟的卵黄生成期卵母细胞(Voc)，提示卵巢发育均成熟 有产卵能力，但早期的核周卵母细胞(Poc)轻微增多。1250倒L DBP处理组Fl代 雌性斑马鱼卵巢组织中成熟的Voc细胞略微减少，皮质囊泡期卵母细胞(Coc)及Poc 2 复黾大学硕士学位论文 复黾大学硕士学位论文 邻苯二甲酸二丁酗对Fl代斑马鱼的毒性研究 细胞增多，提示卵巢发育可能受到轻微的抑制。精巢组织病理学检查则显示DBP处 理组的Fl代雄性斑马鱼精巢发育受到明显抑制，生精小管畸形、精子数量减少及间 质(Leydig)细胞增生同时存在于精巢中。VTG mRNA表达试验发现DBP暴露不诱 导VTGmRNA在染毒亲代及Fl代雄鱼体内表达，提示DBP对斑马鱼无雌激素样效应。 DBP对斑马鱼的毒效应与它引发雄性大鼠、狨猴和人类的睾丸反应相类似，因 此为研究睾丸发育不全综合征(TDS)提供了一个适合的动物模型，在这一领域应 该进行更深入的研究。 关键词：斑马鱼；邻苯二甲酸二丁酯；生长发育；繁殖能力；性腺发育；卵黄蛋白原 3 复旦大学硕士学位论文 复旦大学硕士学位论文 邻苯二甲酸二丁酯对Fl代斑马鱼的毒性研究 Toxic Effect of Dibutyl Phthalate on Fm Zebrafish (Abstract) Dibutyl phthalate(DBP)is a kind of phthalate esters(PAEs)which belongs to environmental endocrine disrupting chemicals(EDCs)and is mainly used舔the plasticizer and softener in plastic products．In recent years，DBP and other types of PAEs have become o