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武汉理工大学博十学位论文摘要
武汉理工大学博十学位论文
摘要
赋与材料以生物功能使其植入体内后能充分调动人体自体修复和完善的能 力,从而实现损伤或病变组织、器官的永久修复,已成为二十一世纪生物材料 发展的方向和前沿。研制理想的骨移植材料是医学和生物材料科学领域中的重 要课题。钙磷材料因其组成与骨组织的矿物成份相近及优良的生物相容性和生 物活性而成为骨移植材料较重要、有潜力的一部分。
本文以材料科学为基础,并向医学、生物化学、生命科学渗透,旨在了解 钙磷材料与蛋白质、细胞、组织的相互作用及其在体内生物化学变化过程和微 结构的演变过程,探讨钙磷材料在体内的成骨机制,为设计具有生物功能的钙 磷骨修复材料和骨组织工程支架材料及钙磷材料在临床上的应用提供依据。
首先通过对人体松质骨的研究,对组成和微结构进行优化设计,将溶解度 适中的p[TCv与NazO.CaO.MgO.P205玻璃粘结剂进行复合,采用发泡法在850C 制备出了具有三维连通、高显气孔率、高比表面,大孔、小孔和微孔相结合, 气孔分布均匀的多孔磷酸钙降解陶瓷,并通过体外模拟实验证实了磷酸钙降解 陶瓷具有良好的降解性能。
通过FT-IR、XPS、SEM及SDS.PAGE分析研究了磷酸钙降解陶瓷对蛋白质 的吸附特性。结果表明磷酸钙降解陶瓷对蛋白质具有较强的吸附能力,FT-IR中 蛋白质特征峰的位移及XPS中磷酸钙Ca2p和Ol S结合能的化学位移表明蛋白 质通过其表面酸性氨基基团及碱性氨基残基以离子键与13-rcP晶体中ca结合, 通过表面碱性氨基以氢键和静电引力的形式与P04}中的氧结合。蛋白质的吸附 过程及机理为:蛋白质在浓度差的推动下向磷酸钙陶瓷表面扩散,然后在磷酸 钙陶瓷表面静电力的作用下通过空间构象的微调,使其表面的正负电荷点与磷 酸钙陶瓷表面相反的电荷点键合导致第一层面不可逆的吸附:随着吸附时间的 延长,在重力及蛋白质分子本身之间的静电引力等因素发生第二层面的物理吸 附;而蛋白质分子与溶液中游离的钙离子结合,通过参与表面进行的生物矿化 作用而吸附到材料的表面,形成第三层面的吸附。
成骨细胞与磷酸钙陶瓷复合培养实验表明磷酸钙降解陶瓷具有很好的细胞
亲和性,能促进成骨细胞在材料表面选择粘附,正常增殖、迁移和生长;并促
武汉理:r大学博:卜学位论文进成骨细胞从G0,al期向s期转化。加速细J胞进入DNA合成期,从而健逃DNA
武汉理:r大学博:卜学位论文
进成骨细胞从G0,al期向s期转化。加速细J胞进入DNA合成期,从而健逃DNA 合成及细胞增殖;促进成骨细胞OCN的表达,提高成骨细胞的活性,促进其向 骨细胞的分化;
组织学观察表明磷酸钙降解陶瓷具有良好的生物相容性、适度的生物降解 性能、一定的生物学活性和骨传导性能。磷酸钙陶瓷的降解吸收和新骨的形成 处于一种动态平衡,降解速率与新骨形成的速率整体上相匹配;新骨『I勺形成过 程与膜内成骨的过程相符,由此确认磷酸钙降解陶瓷的成骨方式为膜内成骨; 多核巨细胞的出现及其吞噬现象,表明材料在体内的降解主要是细胞介导。植 入早期以巨噬细胞为主;破骨细胞处于材料与骨组织界面,主要在中厉期介导。 成骨细胞的成骨活动与破骨细胞的吸收降解活动相关联,降解产物为新骨形成 提供了物质基础;磷酸钙降解陶瓷合适的孔径及表面结构为成骨细胞的附着、 生长和迁徙提供了有利条件;其相互连通的孔隙不仅是细胞和营养物质进出的 通道,且为新生骨组织的生长提供了宽阔的空间。
通过四环索双标记的图像分析,从计量学上得出了磷酸钙降解陶瓷植入区 的成骨速率趋势,对从无机材料到成为有机骨组织成分这一生物转化过程进行 定量分析,为磷酸钙陶瓷在机体内降解和新骨形成提供了理论依据。
通过电子探针对磷酸钙陶瓷与宿主骨界面的研究表明磷酸钙降解陶瓷不仅 能作为骨生长的支架并且参与宿主骨的生命过程,成为有_:命的新生骨组织。 界面元素比的变化表明材料的生物降解和新骨生成过程是既栩互联系又相互制 约的复杂而缓慢的生物转化过程;
通过SEM和TEM的研究表明磷酸钙陶瓷降解产生ff,j{j、磷导致材料与骨 界面处出现电子密集层,促使DCPD、OCP、HAP等品体的沉积;胶原纤维的 矿化一直发生在材料附近,降解和矿化同时进行;由于骨钙素等非胶原蛋白的 识别机制,使胶原纤维的矿化有序进行。’日lal’成熟后矿物棚最终以纳米缎DOHA、 HAP等形式存在{磷酸钙陶瓷与骨直接接触:磷酸钙颗粒与新骨组织间存在多 种界面,在界面处呈平行排列,逐渐解理成为片状结构,并由微米缀转为纳米 级,分散在新生骨组织中,与骨组织交织在一起,最终消失,转化为新骨中的 矿化物质;13-TCP晶体在体液作用下沿(001)面解理,其机制可能是13-NaCaP04 层的形成及B.TCP晶体本身的结构缺陷在烧成过程中引起晶面问的
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