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PCR岗前培训结业考试题 湖南省临床基因扩增检验技术上岗前培训结业考试题 姓名： 单位： 得分： 一、填空题（20 分，每空 1 分，共计 20 分）： 1、 核酸可分为______和______两大类，含有_______、_______、_______、______和________五种元素； 2、 PCR 扩增循环的基本过程包括__________、________和_________，而 RNA的扩增检测需先______________后才能进行 PCR 循环； 3、 以全血作为基因扩增检验标本时，必须注意抗凝剂的选择，不可使用_________________抗凝剂； 4、 目前的定量PCR方法基本上可以归为_________、_________和________三类； 5、 生物安全柜的使用必须注意____________原则、_______________原则、_________________原则和________________原则； 二、选择题（请选择最佳答案，共 5 题，每题 4 分，共 20 分）： 1、肝素对 PCR 标本的影响主要是哪点？ （ ） A、对 PCR 扩增有抑制 B、使核酸共价键断裂 C、肝素结合镁离子影响酶活性 D、抗凝效果不长久 2、DNA 聚合酶需要下列物质才能进行 DNA 复制 （ ） A、dNTP B、Mg ++ C、引物和模板 D、以上都需要 3、在基因扩增检验中，要使用带滤芯吸头吸加液体，主要是为了（ ） A、防止吸液时产生的气溶胶对加样器前端的污染 B、控制吸液量 C、防止吸液时液体对加样器前端的污染 C、以上全是 4、临床倾向于用核酸扩增方法检测结核分枝杆菌，原因主要是因为（ ） A、核酸扩增检测的灵敏度和特异性最好 B、临床容易接受 C、结核分枝杆菌难以培养，需时太长 D、无其它有效的测定方法 5、在定量 PCR 测定中，对原始模板准确定量的影响因素中，最大的是（ ） A、原始模板的量 B、扩增效率 C、扩增周期数 D、扩增产物的量 三、是非题（共 10 题，每题 2 分，共 20 分）： 1、用于RNA提取的试剂含Tirs一类的缓冲液，在使用前需DEPC处理。 ( ) 2、Tap DNA 聚合酶是一种耐热的酶，故 PCR 的变性温度和变性时间对其扩增不会产生明显影响。 ( ) 3、PCR 标准曲线的斜率越接近-3.32 越好。 ( ) 4、核酸扩增仪的孔间温度差异不影响 PCR 扩增效率。 ( ) 5、离心机运转时如果需要打开离心机盖子，也可以开盖使用离心机。 ( ) 6、使用加样器在取液时，只要在其量程范围内其准确度都是一样的。 ( ) 7、在病原体的核酸扩增检验中，假阴性结果的出现与标本采集的时间有一定的关系。 ( ) 8、用于基因扩增检验的临床标本的收集方式与通常的生化或免疫测定标本的收集方法相同。 ( ) 9、生物安全柜内可以放置和使用酒精灯。 ( ) 10、为彻底的防污染，临床基因扩增检验实验室内必须配备生物安全柜且必须为B2 级。 ( ) 四、简答题： 1、请画出理想的实验室示意图并标出各区域内相应的仪器设备。（10 分） 2、简述试剂、耗材的质检方法。（10 分） 3、某实验室当天检测 50 例标本，结果全部为 10 5 以上，分析可能的原因并简述解决方法。（10 分） 4、微生物实验室的污染和 PCR 实验室的污染是否相同，两个实验室隔壁或对门设置会不会互相污染？说说你的理解。（10 分）