外泌体的体内代谢进展.PDFVIP

·652 · 中华急诊医学杂志2019 年5 月第28 卷第5 期Chin J Emerg Med, May 2019, Vol. 28, No. 5 ·综 述 · 外泌体的体内代谢进展 朱亚婕  王杨  唐嘉隆  潘曙明 上海交通大学医学院附属新华医院急诊科  200092 通信作者：潘曙明，Email: panshuming@ 基金项目：国家自然科学基金） DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2019.05.028 外泌体 (exosome) 是一种由细胞主动分泌的具有脂质 能实现完全定量，目前多用总蛋白定量结合描述外泌体的 双分子层膜结构的小囊泡，直径约 30 ～ 100 nm，表面表 直径范围与来源细胞来衡量试验中外泌体的量。同时需要 达 CD63、CD9、CD81、MHC-1 等标志物，内含蛋白质、 注意提取外泌体的方式，不同的离心条件可导致分离出不 核酸等物质 [1-2] 。外泌体是一种重要的细胞间通讯工具，多 同的外泌体亚群 [18-19] 。目前公认的最佳标准是通过差速离 [20-21] 种细胞均都可分泌外泌体，将蛋白质、mRNA 、miRNA 等 心法分离出直径约在 100 nm 左右的外泌体用于实验 。 物质送达受体细胞，调控细胞行为，在肿瘤转移、免疫 收获外泌体后，用荧光染料标记、化学荧光标记和同位素 [3-4] 识别、炎症反应等众多生理病理过程中扮演重要角色 。 示踪法来研究外泌体在体内的代谢过程。其中荧光染料标 近年来外泌体的治疗作用逐渐得到重视，间充质干细胞 记是最常用的方法，多使用碘化物 DiR 、DiD 染料共同孵育， (mesenchymal stem cells ，MSC) 来源外泌体可以治疗急性 但特异性较差。Takahashi 等 [18] 用 Gaussia 荧光素酶（gLuc ） 肺损伤、急性肾衰竭、脑梗死等多种疾病，并已开始相关 与外泌体特有蛋白乳凝集素（lactadherin ）连接，前者遇到 临床试验 [5-7] 。药物在体内的代谢动力学是其发挥疗效的基 其催化底物时产生化学荧光从而实现外泌体的体内追踪， 础 [8], 故认识外泌体在体内的代谢特点十分重要。 特异性较好。也有少数实验使用同位素示踪法 [22-23] 。 1 外泌体的生成与释放 4 外泌体在体内代谢特点 外泌体最初被误认为细胞用来排泄废物的小泡。随后研究 4.1 静脉注射 发现外泌体的生成和释放是受细胞精密调控的。外泌体在细胞 外泌体的颗粒大小可能是决定其代谢分布的重要决定 内的多泡体（multivesicular bodies ，MVBs ）中产生，由ESCRT、 因素之一。纳米 / 微米颗粒（nano/micro particles ，NMPs ） TM4SF、RAB、SNARE 等一系列蛋白参与其形成、运输、转 是通过纳米制造技术制成的微球，可用于研究药物的颗 移与释放 [9-11]。不同细胞来源的外泌体其大小、表面受体和内 粒大小与流体力学特点。研究发现，向血管中注射外泌体 容物往往具有不同特征 [12]。外泌体释放后可广泛分布于血清、 大小类似的 NMPs ，只有少量NMPs 能贴近血管壁与白细 尿液、唾液、母乳、精液等体液中，并通过血液循环到全身。 胞、内皮细胞直接作用。大部分 NMPs 与红细胞一起循 环，并被肝、脾摄取清除 [24] 。人的肝窦的内皮细胞窗大小 2 外泌体的摄取机制