利拉鲁肽降低2型糖尿病非酒精性脂肪肝大鼠肝脏磷酸化JNK的蛋白表达-内科学专业论文.docxVIP

利拉鲁肽降低2型糖尿病非酒精性脂肪肝大鼠肝脏磷酸化JNK的蛋白表达-内科学专业论文.docx

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河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所 有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表 与学位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试 验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。 否则,承担相应法律责任。 研究生签名:为许导师签章: 二级学院领导盖章: 沪rf年乡月,7日 河北医科大学研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 研究生签名:石氛辛 聊麟黼 ≯‘三年3月习日 万方数据 目 目 录 中文摘要 ..1 英文摘要 ..5 英文缩写 ..10 研究论文利拉鲁肽降低2型糖尿病非酒精性脂肪肝大鼠肝脏磷酸化 .INK的蛋白表达 前言日U舌 ..11.. 材料与方法 ..12 结果 ..17 附图 ..20 附表 ..29 讨{仑 ..32 结论 ..36 参考文献 一 36 综述胰高糖素样肽1对非酒精性脂肪肝病的作用 ..39 致谢 ..48 个人简历 ..49 万方数据 中文摘要利拉鲁肽降低2型糖尿病非酒精性脂肪肝大鼠肝脏磷酸化JNK 中文摘要 利拉鲁肽降低2型糖尿病非酒精性脂肪肝大鼠肝脏磷酸化JNK 的蛋白表达 摘 要 目的:非酒精性脂肪性肝病(non.alcohol fatty liver disease,NAFLD) 是糖尿病患者最常见的并发症之一,其主要的病理特征为肝脏脂肪变性, 后者可进一步发展为肝炎、肝硬化甚至肝癌。NAFLD的发病机制尚未明 确,目前认为与肝脏胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)及“二次打击” 有关。c.Jun氨基末端激酶(c.Jun N.terminal protein kinase,inK)信号通路 相关的炎症因子参与了NAFLD发生的中心环节——肝脏IR及“二次打 击”的氧化应激肝损伤,与NAFLD的发生、发展密切相关。肿瘤坏死因 子.0l(tumor necrosis factor Ot,TNF.Cc)作为致炎因子,可诱导JNK信号 通路的活化,进而激活核转录因子.1国(Nuclear factor kappa B,NF.v,B) 的表达,造成肝脏损伤。利拉鲁肽是胰高糖素样肽(glucagon.1ikepeptidel, GLP一1)类似物,近年研究证实,利拉鲁肽不仅具有促进胰岛素分泌、改 善胰岛素敏感性、保护胰岛D细胞、降糖等重要作用,还可以改善肝重、 减少肝内脂肪累积。本研究采用高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素 (streptozocin,STZ)诱导具有胰岛素抵抗特点的2型糖尿病大鼠模型, 观察TNF.0【、JNK磷酸化、NF.r,B与2型糖尿病非酒精性脂肪性肝病的 关系,探讨利拉鲁肽对2型糖尿病大鼠NAFLD的保护机制。 方法:选用健康雄眭Wistar大鼠24只,适应性饲养1周后,采用数 字表法随机分为正常对照组(NC,n-6)和实验组(EX,n=18),NC组采用 标准饲料喂养,实验组采用高脂高糖饲料喂养(含20.0%的蔗糖、10.O%的 熟猪油、2.5%的胆固醇、1.0%的胆酸、66.5%标准饲料)。喂养4周后,实 验组大鼠隔夜空腹腹腔注射链脲佐菌素(STZ,用前以pH4.4的0.1mol/L 柠檬酸缓冲液配成1%的溶液)30mg/kg,NC组仅注射等容积的柠檬酸缓 冲液。于实验的第6周,即注射STZ 2周后,空腹8h测尾静脉血糖,选 择血糖≥7.8mmol/L者为糖尿病成模标准(18只实验动物中14只造模成 功)。将成模糖尿病大鼠按照数字表法随机分为2组:2型糖尿病空白对 照组(DM,n_7)、2型糖尿病+利拉鲁肽干预组(LIR,n=7)。LIR组给予利 万方数据 中文摘要拉鲁肽100 中文摘要 拉鲁肽100 u g·kg一1皮下注射,每日二次,NC组和DM组给予等量的蒸 馏水皮下注射,每周测体重,共干预治疗8周。于实验第14周末,空腹 分别测量体重、血糖,麻醉后心尖取血、分离血清,检测血清中胆固醇(TC)、 甘油---酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL.C)、高密度脂蛋白(HDL.C)、TNF.Q、 NF.K B水平。苏木素伊红(HE)染色观察肝组织病理变化。油红0染色观 察肝组织脂肪变性程度。免疫组化法测定大鼠肝组织JNK、磷酸化JNK (p.JNK)的蛋白表达水平。JNK主要阳性表达于肝细胞浆,少量表达于肝 细胞核,P.JNK阳性表达于肝细胞核。以人工计数法半定量肝组织内J-

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