类胡萝卜素及其抗乳腺癌机理研究-农产品加工及贮藏工程专业论文.docx

华中农业大学2002笨媾士学位论文摘 华中农业大学2002笨媾士学位论文 摘 要 本研究以人乳腺瘀细胞株MDA—MB一435S(Ep)、MCF-7(E黔)馋为裹体波验模型， }、i明吖啶橙／溴乙锭双染法、MTT法、愿伎末端据记法(TUNEL法)、单缨鼹电溶技本、 流式细胞仪检测、划瘦标记荧光染到传辕法、RT—PCR技术以及基圜芯片等现代分予生物 学技术研究了类胡萝b素对乳腺癌细胞的生长抑制、细胞凋亡、细胞周期、DNA损伤、 绷胞间隙连接通讯功能以及基因表达的影响，旨在探讨类胡萝卜素抗乳腺癃的作用规 ，‘塾， 的” 本文采用MTT方法检测了类胡萝b索对人乳腺癌细胞株MDA。MB，435S、MCF一7 的生长抑制作用。0．胡萝b素和虾青索对MCF．7和MDA-MB．435S细煦增娥有较强的 抑制作用，随着作用的浓度增加和作用时间的延长，乳腺癌细胞的生长抑制率也随者增 JJ【J，有明照的剂量和时间效应关系；玉米黄素和玉米黄素双棕榈酸酯对人乳腺癌细胞株 MDA—MB一435S的生妖有促进作用，对人乳腺癌细胞株MCF．7的生长影响不一卜分嘎盟； ，『j黄素对人乳腺癌细胞株MDA。MB一435S的生长有一定的促进作用，但对MCF．7的生 K有明显的抑制作用；番茄红素对人腺癌细胞株MDA-MB-435S的生长有抑制作用，对人 乳腺癌细胞株MCF-7的生长影响不明驻。 2、类胡萝h素对乳腺癌细胞发生凋亡的影响 采用吖啶橙，溴乙锭双染法和TUNEL方法检测了类胡萝p素对人乳腺癌细胞株 MDA—MB*435S、MCF一7细胞凋亡的影响。13．胡萝卜索、虾青素和番茄红索作用 MDA—MB一435S细胞株后，均出现较多的凋亡阳性细胞，角黄素、玉米黄素和玉米黄索 双棕榈酸酯作用MDA，MB．435S细胞株厝，均未出现凋亡阳性细胞。8．胡萝b索、虾 青素和角黄素作用MCF．7细胞株后，均出现了凋亡阳性细胞，番茄红索、玉米黄素和 歪米黄素双棕榈酸酯作用MCF一7细胞株厢，均末出现凋亡阳性细胞。提示：13一胡萝卜 素、虾青素和潘茄红素对MDA—MB一435S细胞的凋亡发生有诱导作用；角黄索、玉米黄 素和玉米黄素双棕榈酸酯对MDA—MB。435S细胞的凋亡发生无诱导作用；p．胡萝b索、 虾青索和蒲茄红索对MCF一7细胞的凋亡发生有诱导ft．Ifj；番茄红素、玉米黄素和玉米 黄索取稼裥酸醑对MCF一7细胞的凋亡无诱导作用。 3、．类胡萝卜索对乳腺癌细胞tl-DNA损伤的影晌 采用单细胞电泳披术检测了类胡萝}、素对入乳腺癌细胞株MDA．MB。435S、MCF．7 细胞的DNA损伤影响。静一胡萝f、索和虾青素对入乳腺癌细胞株MDA．MB一435S和 华中农业大学2002届博士学位论文MCF．7细胞中DNA分子均有较大程度的损伤，且与处理的浓度和时间存在一定的相关 华中农业大学2002届博士学位论文 MCF．7细胞中DNA分子均有较大程度的损伤，且与处理的浓度和时间存在一定的相关 性；玉米黄索和玉米黄索双棕榈酸酯对人乳腺癌细胞株MDA-MB一435S和MCF-7细胞 中DNA分子均无损伤作用；角黄素对MCF．7细胞中DNA分子有一定的损伤作用，对 MDA．MB．435S细胞中DNA分子无损伤作用；番茄红素对MDA．MB一435S细胞中DNA 分子有一定的损伤作用，对MCF．7细胞中DNA分子无损伤作用。 4、类胡萝h素对乳腺细胞增殖周期的影响 ．采用流式细胞仪检测类胡萝h素对人乳腺癌细胞增殖周期的影响。结果表明类胡萝 n素对人乳腺癌细胞株MDA-MB．435S和MCF．7细胞的增殖周期无影响。 5、类胡萝h素对乳腺癌细胞间隙连接通讯功能的影响 采用划痕标记染料示踪技术，检测类胡萝h素对乳腺癌细胞间隙连接通讯功能的影 响。B一胡萝卜素、虾青素和番茄红索对IlIIDA-)4B一435S细胞细胞间隙连接通讯功能具有 较强的促进作用；角黄素、玉米黄素和玉米黄素双棕榈酸酯对MDA-MB一435S细胞细胞间 隙连接通讯功能的影响不明显；13一胡萝n素、虾青素和角黄素对MCF一7细胞的细胞间 隙连接通讯功能具有较强的促进作用；番茄红索、玉米黄素和玉米黄索双棕榈酸酯对 MCF一7细胞间隙连接通讯功能的影响不明显； 6、类胡萝b素对人乳腺癌细胞株MCF-7 bcl．2基因表达的影响 采用RT-PCR方法检测类胡萝卜索对MCF．7细胞株的Bd．2基因表达的影响，均里 不同程度的下调。13一胡萝h素、虾青素、玉米黄素、番茄红素处理后，bcl一2基因的表 达下调程度都较大，其次是角黄素，下调程度最小的是玉米黄素双棕榈酸酯。 7、§一胡萝n素对人乳腺癌细胞株MCF．7的基因表达的影响 采用基因芯片检测B一胡萝h素对人乳腺癌细胞株MCF-7的基因表达的影响。筛选 出18条下调基因和3条上调基因