微生物在药学中专业技术应用专业技术.pptVIP

第四篇微生物在药学中的应用　　;抗生素（antibiotics）;分类;（2）按作用对象;医疗用抗生素的特点;抗生素传统分离方法;抗生素生产的工艺过程;1、 菌种－ 保藏的品种经复壮后备用 2 、孢子制备－?固体培养基上大量培养孢子 3 、种子制备－获得菌丝供发酵之用。 4 、发酵 （1）接种量10% 左右，周期4-5天； （2）培养基—糖类，淀粉，花生饼粉，黄豆饼粉，玉米浆，蛋白胨； （3）补料工艺—延长抗生素分泌期，增加产量； （4）前体—如Pen发酵的前体为苯乙酸或苯乙胺等； （5）pH （6）温度：夹套或蛇管冷却水散热（渗漏时易导致染菌，喷淋冷却也一样）;（7）通气搅拌： 机械搅拌 ；挡板防涡流 （8）消泡沫：?玉米油、豆油、泡敌—聚氧乙烯氧丙烯甘油0.01-0.02% （9）消毒灭菌，防止杂菌污染 菌种、空气、培养基、管道设备、防噬菌体。 （10）放罐时间： 菌丝浓度、形态、残糖、氨基氮、pO2 、pH、效价。 5 、发酵液的预处理 （1）发酵液中含Ca 2+ 、 Mg 2+ 、 Fe 3+ 、Protein等杂质； （2）Ca 2+ + 草酸 → 草酸钙↓（还可促进蛋白质沉淀） （3）磷酸盐除Mg 2+ （4）黄血盐除Fe 3+ （5）ZnSO4与黄血盐形成复盐吸附蛋白质 （6）过滤;6 、抗生素提取和精制 （1）溶媒萃取法—Pen （2）离子交换法—氨基糖苷类抗生素 （3）吸附法（活性炭、大孔吸附树脂）—头孢菌素 （4）沉淀法——四环素 7 、成品检定和包装;抗药性 （drug resistance）p305;抗菌药物的发展史也就是细菌对其耐药性的发展史;（一）、抗药性产生的遗传机制 1 、自发突变与药物选择 （1）由敏感菌的遗传物质自发突变产生。 （2）药物选择的结果是杀死敏感菌，耐药菌富集。 2 、 细胞间抗药性的基因转移 染色体上的耐药基因—通过接合、转化、转导和转座子而转移。 质粒上的耐药基因—自行复制，代代相传，并在不同种属间转移（性菌毛的接合作用）;（二）、抗药性产生的生化机制;耐药性和青霉素酶的测定;抗生素的效价单位及效价测定法 p308;抗生素效价;抗生素效价单位;二、抗生素的效价测定—管碟法;第二十章 药物的体外抗菌试验 抗生素的体外抑菌实验 　MIC——最低抑菌浓度 MBC——最低杀菌浓度 　;药物体外抗菌试验;第二十一章 药物制剂的微生物学检查 ;灭菌制剂： 　 注射剂 眼科制剂 手术用品（敷料、缝合线、无菌器具等）;一般药品的无菌检查——直接接种法 需氧菌、厌氧菌、霉菌的检查 需氧菌：30~35℃，7天 厌氧菌：30~35℃，7天 霉 菌：20~25℃，7天 观察培养液是否混浊或涂片染色镜检; 阳性对照—（24 h有菌生长） 金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003 生孢梭状芽胞杆菌CMCC（B）64941 白色念珠菌CMCC（F）98001;二、特殊药品的无菌检查法 1 、油类药物 用吐温培养基 2、抗菌药物或含防腐剂药物 适宜的培养基 ?????青霉素—加入青霉素酶 磺胺药—对氨基苯甲酸培养基（可使菌合成叶酸，不被干扰） 培养基稀释药品至不抑制微生物生长?????? 薄膜过滤法;结果判定： 阳性对照长菌 阴性对照不长菌 样品不长菌 ——无菌检查合格;第二节 非灭菌制剂的微生物限度检查;一、细菌总数测定(琼脂倾注平皿计数) 1 阴性平板不长菌 2 细菌37℃培养24~48 h 3 细菌总数结果报告方式 （1）高、低稀释度菌落数在30~300以内，计算比值； （2）比值≤2，以高稀释度平均值为准； （3）比值2，以低稀释度为准??;二、霉菌（酵母）总数测定 虎红培养基， 25~28℃，48~72 h，5~50个菌落 ;三、控制菌（质控菌）的检查 1 口服药—不能检出沙门氏菌、大肠杆菌 2 外用药、眼科制剂—不能检出金葡菌、绿脓杆菌、破伤风梭菌。;质控菌检测方法;四、活螨的检查 用放大镜检查节肢动物螨虫是否存在 ;思考题