第9章食品中外源外源化学物致突变作用.PPT

* （三）微核试验(micronucleus test，MNT） 1. 动物选择：大、小鼠，以小鼠最为广泛，刚成年，20g左右，每组10只，♀♂各半。 2. 染毒途径：经口、经皮、经呼吸道及注射等。 3. 染毒次数及取样时间：不同化学毒物诱发微核出现的高峰时间不尽相同，在24~72h波动。建议采用多次染毒的方法。其中以４次染毒比较方便合理，即每天染毒一次，连续4天，第5天取样。也可采用30h两次给药法，即两次给受试物间隔24h，第二次给受试物后6h取材。 ４. 剂量选择和分组：至少两个处理组（高：LD50/7的80%，低： LD50/7的40%），阳性对照组（环磷酰胺），阴性对照组 * （三）微核试验(micronucleus test，MNT） 5. 骨髓液的制备和涂片： 6. 固定：甲醇溶液固定 7. 染色：Giemsa应用液染色 ８. 观察计数：计数1000个PCE中含微核的PCE数,并且计数200个细胞中PCE与NCE的比值。 如果试验组微核细胞率显著高于阴性对照组；并有剂量反应关系，即可认为受试物对该试验动物的骨髓细胞染色体有损伤作用。 * MN NCE * (四)小鼠精子畸形分析和睾丸染色体畸变分析 精子形态受基因控制，受常染色体、X、Y性染色体决定。 本实验可检测环境因子在体内对生殖细胞的致突变作用。 小鼠睾丸染色