第四章 基因克隆的载体.pptVIP

3.pBR322质粒载体 “P”表示是一种质粒； “BR”表示两位主要构建者姓氏的头一个字母“F.Bilivar和R.L.Rodriguez”; “322”表示实验编号。 (Tetr) pBR322的构建： 为改进转化子筛选技术，并具有相对小的分子量、高拷贝数、外源基因插入不影响质粒的复制功能、多克隆位点（多种限制酶的单一切割位点）、质粒的稳定性（克服质粒的结合转移能力） pBR322的结构来源 * 第四章 基因克隆的载体 目的基因 基因载体 重组体 分 切 接 转 筛 表 基因重组步 骤 图解 载体（vector）是指能携带外源基因进入宿主细胞的运载工具。 早期：质粒、病毒、噬菌体 新增：人工微小染色体、 YAC载体 作为基因工程的载体，必须具备以下几个性能： 1、具备自主复制的能力；即能独立于染色体而进行自主复制； 2、具有合适的选择标记，便于重组DNA分子的检测； 3、要有尽可能多种限制酶的切割位点，便于外源基因插入； 4、载体分子中有一段不影响它们扩增的非必须区域，插入其中的外源基因可以象载体的正常组分一样进行复制和扩增； 5、具有较好的安全性，不能任意转移，避免基因非控制性扩增。 pSVK3质粒，PBV, Ti质粒 环状 动物细胞 和细菌 穿梭载体 SV