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ScienceDirect Global Training Programme, March 2003 第二章 酶工程基础 Contents of chapter 2 第一节 酶的基本概念 第二节 酶的活力测定 第三节 酶分子的结构与功能 第四节 酶促反应动力学 第一节 酶的基本概念 一、酶的分类 二、酶的命名 三、酶的催化特性 什么是酶？ 酶是活细胞产生的一类具有催化功能的生物分子，所以又称为生物催化剂Biocatalysts 。 酶催化的生物化学反应，称为酶促反应Enzymatic reaction。 在酶的催化下发生化学变化的物质，称为底物substrate。 一、酶的分类 （一）蛋白酶的分类 （二）核酸类酶（R酶）的分类 （三）国际系统分类法 （一) 、蛋白酶的分类 单体酶 肽链 寡聚酶 多酶体系 多酶复合体 多功能酶 单体酶，寡聚酶，多酶体系 1、单体酶(Monomeric enzyme)：由一条多肽链构成的酶。大多数的水解酶。 2、寡聚酶(Oligomeric enzyme)：由几个或多个亚基组成。亚基之间以非共价键结合。如：糖代谢的酶。 单体酶，寡聚酶，多酶体系 3、多酶体系(Multienzyme system)：由几个功能上相关的酶嵌合而成的酶的络合物。 多功能酶（multifunctional enzyme）：一些多酶体系在进化过程中由于基因的融合，形成由一条多肽链组成却具有多种不同催化功能的酶。 （二）、核酸类酶（R酶）的分类 核酸酶 ribozyme：是非蛋白酶。它是一类特殊的RNA，能够催化RNA分子中的磷酸酯键的水解及其逆反应。 根据酶催化反应的类型，可以将R酶分为剪切酶，剪接酶，和多功能酶等三类。 根据R酶的结构特点不同，可分为锤头型R酶，发夹型R酶，含I型IVS的R酶，含II型IVS 的R酶等。 （三）、国际系统分类法 1961年国际酶学委员会（Enzyme Committee, EC）根据酶所催化的反应类型和机理分为： 二、酶的命名 1、根据其催化底物来命名；如：淀粉酶 2、根据所催化反应的性质来命名；如：转氨酶。 3、结合上述两个原则来命名，如：谷丙转氨酶。 4、有时在这些命名基础上加上酶的来源或其它特点。如：小牛小肠碱性磷酸酶。 三 酶的催化特性 （一）酶和一般催化剂的共性 （二）酶催化作用特性 （一）酶和一般催化剂的共性 1、用量少而催化效率高。 2、它能够改变化学反应的速度，但是不能改变化学反应平衡。 3、酶能够稳定底物形成的过渡状态，降低反应的活化能，从而加速反应的进行。 （二）酶催化作用特性 1．高效性 有酶加入比无酶参加反应速度一般要高107-1013 例如： 2H2O2 2H2O + O2 过氧化氢酶的催化效率为Fe+ 催化的1010 倍。 用?-淀粉酶催化淀粉水解，1克结晶酶在65?C条件下可催化2吨淀粉水解。 2．专一性 Specificity 酶的专一性 又称为特异性，是指酶在催化生化反应时对底物的选择性 酶作用专一性的机制 相对专一性：可作用于一类或一些结构很相似的底物。 绝对专一性：只能作用于某一底物。 立体异构专一性：一种酶只能作用于一种立体异构体，或只能生成一种立体异构体。 3．反应条件温和 酶促反应一般在pH 5-8 水溶液中进行，反应温度范围为20-40?C。 高温或其它苛刻的物理或化学条件，将引起酶的失活。 4.酶活力可调节控制 许多因素可以影响或调节酶的催化活性: 1. 酶浓度的调节 2 激活剂调节 3. 共价修饰调节 4. 酶原激活 5. 抑制剂的调节 6. 反馈调节 第二节 酶的活力测定 一．酶活力 二．酶活力单位 三．酶的比活力 四．酶的转换数kcat 五．酶活力的测定方法 三．酶的比活力 酶的比活力:每毫克质量的蛋白质中所含的某种酶的催化活力，单位/毫克蛋白（U/mg蛋白质)。 酶的比活力＝酶活力(单位)/mg(蛋白质或RNA) 酶的比活力是比较酶制剂纯度和活力的一个指标。 四．酶的转换数Kcat 酶的转换数Kcat:单位时间内，酶分子中每个活性中心或每个分子酶所能转化的底物分子数，单位min-1，是酶催化效率的一个指标。 如果每个酶分子只有一个催化中心，那么催化中心活性等于摩尔催化活力。 摩尔催化活力:每摩尔酶每分钟催化底物转化为产物的摩尔数。 五．酶活力的测定方法 终止法：在恒温系统中进行酶促反应，间隔一段时间之后，终止酶反应，然后测定反应物的消耗量或产物的生成量，从而计算出酶活