酶在医药学上的运用41资料文档.pptVIP

酶与某些疾病发生的关系 酶在疾病诊断上的应用 酶在疾病治疗中的应用 固定化酶及其在医药领域的应用 一、酶与某些疾病发生的关系 1. 酪氨酸酶缺陷——白化病 2. 胱硫醚合成酶缺陷——同型胱氨酸尿症 3. 苯丙氨酸羟化酶缺陷——苯丙酮酸尿症 二、酶在疾病诊断上的应用 三、酶在疾病治疗中的应用 1990年首次基因疗法 四、固定化酶及其在医药领域的应用 1. 固定化酶的优点： 极易将固定化酶与底物、产物分开，因而简化了提纯工艺； 可以在较长时间内反复使用，有利于工艺的连续化、管道化； 酶反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化和微电脑化，易于与各种分离手段联用； 在绝大多数情况下提高了酶的稳定性； 可以增加产物的收率，提高产物质量； 较能适应于多酶反应; 酶能够重复利用，使用效率提高，成本低； 提高操作的机械强度。 2. 固定化酶的缺点： 酶固定化时酶的活力有所损失。同时也增加了固定化的成本，使工厂开始投资大。 比较适应水溶性底物和小分子底物。 与完整细胞比较，不适于多酶反应，特别是需要辅因子的反应，同时对胞内酶需经分离后．才能固定化。 三、固定化技术 1、吸附法 2、包埋法 3、通过双功能试剂进行共价交联 4、和水不溶性载体共价结合 优点：操作简单，反应条件温和，酶活力损失少，载体可反复使用。 缺点：易引起蛋白质表面变性，且由于结合力 弱，当反应液的pH值、离子强度、温度、底物浓度等发生变化时，会导致酶易从载体上部分或全部脱落。 第一个离子结合法固定化酶： DEAE — Cellulose 固定化过氧化氢酶 第一个工业化的固定化酶： DEAE-Sephadex A-50 固定化氨基酰化酶 4、共价键合法(Covalent bonds) 优点：此法制得的固定化酶，酶分子和载体间的共价键较牢固，在介质组成发生改变和进行反应时，都不会造成酶的脱落，因而可以反复使用。 缺点：制取固定酶较复杂，反应条件比较剧烈，所以要制得酶活力很高的固定化酶较为困难。 制作方法：有重氮化法、烷基化和芳基化法、肽法和戊二醛法等。 2、 固定化多酶反应 3、 固定化酶在分离提纯上的应用 8.1 酶在药物制造方面的应用 8.2 酶在食品、酿造、饲料方面的应用 淀粉制糖、发酵、酒精、 食品（包括果蔬汁、啤酒酿造、谷物食品、蛋白水解、和功能食品以及食用油脂） 饲料 8.3 酶在轻工、化工方面的应用 用酶进行原料处理 用酶生产各种轻工、化工产品 用酶增强产品的使用效果。 8.4 酶在环境保护中的应用 环境监测 废水处理 过氧化物酶 多酚氧化酶 可降解材料开发 8.5 酶在生物技术方面的应用 除去细胞壁 大分子切割 大分子连接 问答题 微胶囊包埋法 将酶包埋在半透性聚合体膜内，形成的直径为1~100um。 胶格包埋法 首先被采用的胶格包埋法是： 固定化胰蛋白酶 木瓜蛋白酶 ?－淀粉酶 Enzyme+N, N-甲叉双丙稀酰胺, 丙稀酰胺 引发剂－－inactiation 3、交联法 依靠双功能基团的试剂，使酶蛋白分子之间发生交联，凝集成网状结构而成为固定化酶。 酶分子之间共价交联和与水不溶性载体共价结合酶分子 酶蛋白的非必需基团通过共价键和载体形成不可逆的连接。 共价结合法要注意两个问题： ①参加载体共价结合应不是活性中心基团，也不是参与酶蛋白的高级结构的必需基团，否则会使固定化酶不呈现出酶活力。 ②载体必须具有在温和条件下可与酶蛋白发生偶联反应的基团，又有一定的机械强度和较大的表面积。 仅可用于低分子量的底物，不适用于柱系统，常有扩散限制问题 包埋材料、包埋方法可选余地大，固定化酶的使用面广，包埋条件温和 包埋法 交联条件激烈，机械性能差 可用的交联试剂多，技术简易，酶的结合力强，稳定性高 交联法 偶联条件激烈，易引起酶失活；成本高，某些偶联试剂有一定毒性 载体与偶联方法可选择性大；酶的结合力强，非常稳定 共价法 结合力弱，对pH、离子强度、温度等因素敏感，酶易脱落，酶的装载容量较小 制作条件温和、简便、成本低、载体再生、可反复使用 吸附法 缺 点 优 点 方 法 各种酶固定化方法的比较 泵 储 罐 反应产物 离心机 消旋反应器 固定化酶柱子 晶体 L-Ala L-Ala A-D-Ala A-L-Ala A-D-Ala 四、固定化酶的应用 1、使用酶柱式固定化酶连续催化反应 青霉素酰化酶与抗生素改造 生产人参皂甙-Rh2 黑曲霉等微生物 β-葡萄糖苷酶 生产L-氨基酸 动物、植物、微生物 蛋白酶 生产核苷酸 微生物 核糖核酸酶 由猪胰岛素（Ala-30）转变为人胰岛素（Thr-30） 细菌 无色杆菌蛋白酶 生产聚肌胞，聚肌苷酸 微生物 多核苷酸磷酸化酶 生产各种核苷酸 桔青霉等微生物