抗原抗体反应教案.docVIP

PAGE 行业文档 (word可编辑版) 大连医科大学检验医学院 教 案 教 研 室： 临床微生物与免疫 学 科： 免疫检验 授课题目： 抗原抗体反应 授课对象： 医学检验 授课时间： 年 月 日 时至 年 月 日 时止 授课教师： 大连医科大学检验学院制 教学目标及基本要求 了解抗原抗体反应的化学本质(原理)、特点； 掌握影响抗原抗体反应的因素及常用血清学反应的种类。 教学内容提要及时间分配 1.?抗原抗体反应的原理 20min 2. 抗原抗体反应的特点 30min 3. 影响抗原抗体反应的因素及常用血清学反应 1学时 教学重点及难点 重点：抗原抗体反应的特点、影响因素及常用血清学反应。 难点：抗原抗体反应的化学本质。 教学内容 抗原抗体反应 (Antigen-antibody Reaction) 抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。它既可发生于体内，也可发生于体外。 在体内，抗原抗体反应是体液免疫(System immune)的基础。 ——Ag与Ab在体内结合可发生吞噬、溶菌、杀菌、中和毒素等作用，这些都是机体的体液免疫效应的表现方式； 在体外,抗原抗体反应是血清学反应(Serologic reaction)的基础 ——Ag与Ab在体外(如试管)结合，可出现凝集、沉淀、补体参与的溶血等反应。因抗体主要存在于血清中，临床上一般多采用血清作试验。所以体外的抗原抗体反应又称为血清学反应。 一、抗原抗体反应的化学本质 (原理) 1. 结构基础：Ag决定簇与Ab Fab段超变区之间的互补性。 Ab N端可变区形成一个平穴槽，大小约150×6×nm。 Ag如楔状嵌入，其中超变区氨基酸残基的变异性使槽沟形状千变万化。只有与其空间结构互补的Ag决家簇才能嵌入，其关系如钥匙和锁。 2. 化学变化： ① 四种分子间作用力参与并促进Ag-Ab的反应 a. Ag与Ab分子上带相反电荷基团 (-NH3+-CO -)之间的引力 b. Vander waal’s forces (范德华力) c. 氢键 d. 疏水作用(Ag、Ab分子侧链上的非极性氨基酸之间) (极化的原子或分子间的作用力) ② 理化性质改变：亲水胶体转化为疏水胶体 抗原抗体反应之所以所能出现可见的反应现象，例如沉淀、凝集，是因为抗原抗体反应不仅包括特异性结合阶段，还涉及到非特异性的促凝聚过程。换言之，抗原抗体反应也是由亲水胶体向疏水胶体转变，进而凝聚成大复合物的过程。 抗体是球蛋白，大多数抗原亦属蛋白质。它们在通常血清学反应条件下，均带有负电荷使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体，因此不会自行聚合发生沉淀。当抗原与抗体特异性结合后，电荷因结合而减少或消失，水化层被破坏，并由于形成复合物，与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏水胶体。此时在电解质(例如NaCl)的作用下，使各疏水胶体之间更易靠扰聚集，形成可见的抗原抗体复合物。 抗原抗体反应的胶体状态的变化过程总结如下。 Ag+Ab 特异性结合 AgAb 电解质 (AgAb) n 亲水胶体 带电荷的疏水胶体 疏水胶体凝集 3. 反应过程： Ag-Ab反应可分为二个阶段：①不可见阶段——Ag与Ab发生特异结合，但不出现，可见反应，此阶段反应快，仅需几秒至几分。 ②可见阶段——Ag与Ab复合物在环境因素 (一定的pH、电解质、温度、补体)的影响下，表现为凝集、沉淀、溶解、补体结合等肉眼可见的反应。此阶段反应慢，常需数分钟至数小时。 当然，在血清学反应中，而阶段往往不能严格分开。 二、抗原抗体反应的特点： 1. 特异性：由结构基础决定，如同钥匙与锁的关系。 例如 抗毒素只能与白喉毒素结合，而下能与破伤风毒素结合。这种高库的特异性是一切血清学反应的基础，所以临床上通过检测Ag或Ab可以诊断或辅助诊断疾病。 但是Ag Ab反应针对的是Ag决定 ，如果两种不同的抗原分子上具有相同的Ag决定 ，则可与彼此相应的抗血清发生交叉反应。 因此，临床上用 血清学反应的Ag或Ab制剂要常做鉴定和提纯，以确保试验的准确性。 2. 最适比例 抗原抗体结合出现可见反应，抗原和抗体二者之间遵循一定的量比关系，只有当它的浓度比例合适时，才出现可见反应。以沉淀反应为例，在加入固定量抗体的一排试管中再依次加入一定体积的递增浓度的抗原进行反应时，我们发现随着抗原浓度的增加，沉淀很快大量出现，但超过一定范围之后，沉淀速度和沉淀量随抗原浓度增加反而迅速降低，甚至到最后无沉淀出现。沉淀反应的速度反映了参加反应的抗原和抗体浓度的适合程