实验七和八提质粒,酶切,PCR.pptVIP

实验七　质粒DNA的提取　　与酶切  质粒： 　　　质粒(plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子，大小在1一2OOkb之间，具有双链闭合环状结构的DNA分子，主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中。 质粒具有自主复制和转录能力，能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数，可表达它携带的遗传信息。它可独立游离在细胞质内，也可以整合到细菌染色体中，它离开宿主的细胞就不能存活，而它控制的许多生物学功能也可对宿主细胞的相应缺陷进行补偿。 本实验分离纯化的质粒为插入一个外源基因到pET9a 的pETC质粒, 大约有 4341+650 碱基对(bp). 所有分离质粒DNA的方法都包括三个基本步骤: 1.培养细菌使质粒扩增; 2.收集和裂解细菌; 3.分离和纯化质粒DNA。 所有分离质粒DNA的方法都包括三个基本步骤 1.培养细菌使质粒扩增; 2.收集和裂解细菌; 3.分离和纯化质粒DNA。 大肠杆菌质粒DNA的分离及纯化（碱变性法） 试剂配方： 1. Solution I (GET): 5O mmol/L 葡萄糖， lO mmoI/L EDTA-