微生物遗传育种实验-powerpointpresent资料文档.pptVIP

微生物遗传育种实验 -氨基酸营养缺陷型突变株的筛选 一、目的要求 了解营养缺陷型突变株选育的原理。 学习并掌握细菌氨基酸营养缺陷型的诱变、筛选与鉴定方法。  二、基本原理 营养缺陷型是指野生型菌株由于某些物理因素或化学因素处理，使编码合成代谢途径中某些酶的基因突变，丧失了合成某些代谢产物(如氨基酸、核酸碱基、维生素)的能力，必须在基本培养基中补充该种营养成分，才能正常生长的一类突变株。这类菌株可以通过降低或消除末端产物浓度，在代谢控制中解除反馈抑制或阻遏，而使代谢途径中间产物或分支合成途径中末端产物积累。在氨基酸、核苷酸生产中已广泛使用营养缺陷型菌株。 三、实验材料 1）菌种：细菌1299 2）培养基： 细菌完全培养基； 细菌基本培养基 无氮基本培养基；2 倍氮源基本培养基 3）仪器： 台式离心机、恒温培养箱、电炉等 四、实验步骤 （一）培养基制备、细菌对数期培养 1.配制培养基：每组的配量 肉汤培养基：100ML 取10ML分装2支小试管，包扎，灭菌。 完全培养基：在剩余的90ML肉汤培养基中加入琼脂，装入 三角瓶中，包扎，灭菌。 无氮培养基：100ML 取10ML分装2支大试管，包扎，灭菌。 2倍氮培养基：在剩余的90ML无氮培养基中加入0.2% （NH4）2 S