硫化氢在脑血管内皮舒张功能中的作用及杜鹃花总黄酮抗缺血性脑损伤作用机制-药理学专业论文.docxVIP

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万方数据 万方数据 安徽医科大学 ANHUI MEDICAL UNIVERSITY 博 士 学 位 论 文 硫化氢在脑血管内皮舒张功能中的作用及杜鹃花总 黄酮抗缺血性脑损伤作用机制 Role of hydrogen sulfide in endothelium-derived relaxation on cerebral artery and protective mechanism of total flavones of rhododendra against ischemic cerebral injury 作者姓名 胡友洋 指导教师 陈志武教授 学科专业 药理学 研究方向 心脑血管药理学 论文工作时间 2011 年 8 月至 2014 年 9 月 2014 年 11 月 学位论文独创性声明 本人所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已 经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确说明并表示谢意。 学位论文作者签名: 日 期: 学位论文使用授权声明 本人完全了解安徽医科大学有关保留、使用学位论文的规定:学校有权保留 学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版,有权将学 位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅,有权将学 位论文的内容编入有关数据库进行检索,有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。 愿意将本人的学位论文提交《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学 位论文全文数据库》和《中国学位论文全文数据库》中全文发表,并可以以电子、 网络及其他数字媒体形式公开出版,并同意编入 CNKI《中国知识资源总库》,在 《中国博硕士学位论文评价数据库》中使用和在互联网上传播。保密的学位论文 在解密后适用本规定。 学位论文作者签名: 导师签名: 日期: 日期: 安徽医科大学博士学位论文 目 录 英文缩略词表(abbreviation)…………………….………………………………….1 摘 要 ……………………………………………………………………..…….……...3 ABSTRACT…………………………………………………………………………….7 1.前言………………………………………………………………………………….12 2.材料与方法………………………………………………………………………….16 2.1 细胞来源………………………………….…………………………………….16 2.2 实验动物…………………………….………………………………………….16 2.2.1 鉴定方法16 2.2.2 鉴定结果17 2.3 药品与试剂……………………………………………………………………..17 2.4 配置的试剂……………………………………………………………………..19 2.5 仪器与设备……………………………………………………………………..19 2.6 试验方法和动物模型………………………………..…………...…….………21 2.6.1 CSE-siRNA体内转染大鼠模型建立 21 2.6.2 q-PCR方法检测大鼠脑血管CSE-mRNA的表达 21 2.6.3 血管组织CSE酶活性测定 25 2.6.4 离体血管张力测定25 2.6.5 局灶性大鼠脑缺血再灌注(I/R)模型建立 30 2.6.6 局灶性小鼠脑缺血再灌注(I/R)模型建立 31 2.6.7 动物神经功能缺陷评分31 2.6.8 脑梗死体积测定32 2.6.9 bEnd.3 细胞培养 33 2.6.10 bEnd.3 细胞缺氧再给氧(OGD/R)模型建立 33 2.6.11 细胞生存率检测34 LDH、SOD及CAT检测 34 安徽医科大学博士学位论文 细胞内总ROS检测 35 细胞SIRT6 mRNA 定量PCR检测 35 细胞SIRT6 蛋白检测 35 2.7 统计学处理………………………………………………..………………36 3 实验结果……………………………………………………………………..……36 3.1 大鼠在体转染 CSE-siRNA 对其脑血管 CSE 表达的影响….……. 36 3.1.1 大鼠在体转染 CSE-siRNA 对脑血管 CSE-mRNA 表达的影响 36 3.1.2 大鼠在体转染 CSE-siRNA 对血管组织 H2S 生成的影响 37 3.2 内源性 H2S 在脑血管舒张中的作用 38 3.2.1 ACh 的脑血管舒张作用 38 3.2.2 PPG 对 ACh 脑血管舒张作用的影响 40 3.2.3 H2S 合成酶 CSE 底物 L-Cys 的脑血

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