基因分析仪的使用与应用毛细管电泳带电悬浮颗粒或大分子在一定.ppt

310基因分析仪的使用与应用 　　　　　　　毛细管电泳 　　带电悬浮颗粒或大分子在一定介质中因电场作用而发生移位运动的物理化学现象。 颗粒或大分子的迁移速率取决于电势差、颗粒带电量和颗粒大小、形状。 　1937年瑞典化学家Tiselius蒂塞利乌斯运用电泳成功分离血清蛋白，获得1948年诺贝尔化学奖，开创了电泳技术的新纪元。 毛细管电泳（CE） 以毛细管为分离通道，高压直流电场为驱动力的新型液相分析技术。 　可将有生物化学意义的复杂化合物在不改变其性质的前提下进行分离． 应用：蛋白质分离、糖分析、DNA测序、手性分离、单细胞分离。 毛细管电泳（CE）分离 开始阶段，样品自由迁移，位置由速度决定 组分分开后，位置由介质性质决定 自由迁移 电泳介质 不连续介质：由前导(TE)＋终末(TE）电解质组成。 　　　　　　各组分分开形成的区带按速度大　　小排列，区　　　　　　 　　　　　　带与LE，TE都以　　等速前进。 连续介质：区带相互分开，以各自速度独立迁移. PH梯度：弱解离样品变速迁移－－按平均速度分析。两性样　　　 　　　　　品在PH＝PI（等电点）位置，没有净电荷，不受电　 　　　　　场作用　　　　.分离区带停止在各自对应的等电点　　 　　　　　位置上。 毛细管电泳仪基本结构图 1 仪器原理简介 毛细管凝胶电泳 四色荧光标记 两大软件模块 Sequncing Gene Scan 310 DNA 测序仪原理简图 基因序列测定 基因扫描分析 主 要 特 点 1. 分辨率 2. 灵敏度 3. 高效性，高信息含量 4. 自动化: 灌胶、进样、数据收集 2 仪器使用 注意室温恒定20±5℃ 3 应用范围 1.基因测序 未知序列 序列比较 真菌细菌鉴定分型的 rRNA测序 器官移植配型分析的HLA基因测序 HIV病毒突变检测 2.SNP分型 77,000个SNP位点 * * 组分沿毛细管轴的速度V 一定时间t所迁移距离L 定长分离：固定位置安装检测器记录分子通过该位置的情况(tR)，可得图形信号－－电泳谱图 *