利多卡因联合亚低温治疗对大鼠SAH早期脑损伤保护作用的研究-神经病学专业论文.docxVIP

泰山医学院硕士学位论文 泰山医学院硕士学位论文 万方数据 万方数据 利多卡因联合亚低温治疗对大鼠 SAH 早期脑损伤保护作用的研究 研究生：刘金华 专 业：神经病学 导 师：孙保亮 教授 中文摘要 目的 1、用枕大池二次注血法构建大鼠 SAH 后 EBI 模型，探讨枕大池注射利多卡因 联合亚低温治疗对大鼠 SAH 后早期脑损伤是否具有神经保护作用。 2、枕大池注射利多卡因联合亚低温治疗对大鼠 SAH 后早期脑损伤，不同时程 的疗效有无差别。 方法 选用体重280-320 g 健康清洁级成年 SD 大鼠60只，雌、雄鼠各30只，随机分五 组（每组动物12只）：对照组、SAH 组、SAH+利多卡因+亚低温2h 组、SAH+利多卡 因+亚低温4h 组和 SAH+利多卡因+亚低温6h 组。SAH 组、各 SAH+利多卡因+亚低温 组采用枕大池二次注血0.3ml, 各 SAH+利多卡因+亚低温组于2次注血0.3ml 后再注入 2%利多卡因0.02m1后立即用冰袋全身降温治疗，对照组除不给予注血和治疗外，其 余处理与其他各组相同。每个亚低温治疗组的大鼠体温控制在31℃-33℃，其它两组 体温保持在正常范围。用激光多普勒检测各组大鼠术前1小时、枕大池二次注血后24 小时、48小时皮层局部脑血流（rCBF），同时观察 SD 大鼠行为、神经功能变化，在 枕大池二次注血后48小时进行神经功能评分。然后将大鼠用10%水合氯醛再次麻醉后 处死取脑，对脑组织行 HE 染色，取海马组织切片对海马神经元形态及密度进行组织 病理观察, 取脑基底动脉切片通过医学图像分析系统计算脑基底动脉血管壁厚度，观 察血管收缩情况，测量对比血管内径周长；给大鼠静脉注射伊文思蓝，处死动物后对 其脑组织 EB 含量进行测定；用干湿重法测量脑组织中水分的重量；用酶联免疫吸附 法检测大鼠脑皮层中炎性因子 IL-1β、TNF-α 和 IL-6表达情况；免疫组化法检测脑组 织中凋亡信号调节激酶 I（ASK-1）、热休克蛋白（HSP27）的表达情况。通过以上检 测数据来探讨枕大池注射利多卡因联合亚低温治疗对 SAH 后 EBI 是否具有神经保护 作用，枕大池注射利多卡因联合亚低温治疗对大鼠 SAH 后早期脑损伤，不同时程疗 1 效有无差别。 结果 1、病理观察：蛛网膜下腔出血组切片显示基底动脉变细，管壁增厚，炎性细胞 浸润，海马正常神经元损伤严重。对照组与 SAH 组相比：海马正常神经元密度正常, 未见明显血管痉挛，无明显血管损伤。利多卡因+亚低温各组损伤较 SAH 组轻,其中 以利多卡因+亚低温6小时组损伤最轻。 2、脑血流监测结果：与注血前相比，SAH 组 2 次注血后 48h 脑血流量下降 58%， SAH+利多卡因+亚低温 2 小时组 2 次注血后 48h 脑血流量下降 60%，SAH+利多卡因 +亚低温 4 小时组 2 次注血后 48h 脑血流量下降 44%，SAH+利多卡因+亚低温 6 小时 组 2 次注血后 48h 脑血流量下降 42%。注血前各组脑血流差异无统计学意义（P0.05）， 与注血前相比，各组 2 次注血后 24h、48h 脑血流水平变化有显著差异(P0.05)。SAH+ 利多卡因+亚低温 6h 组与 2h、4h 组相比，结果具有差异，差异具有统计学意义 （P0.05），SAH+利多卡因+亚低温与 SAH 组相比，结果具有差异（P0.05） 3、脑水肿指数测定结果：与对照组相比，蛛网膜下腔出血组大鼠脑水肿指数增 加明显，48h 测得的脑水肿百分数达到84.92％（P0.05）；SAH+利多卡因+亚低温2h 组与 SAH 组比，48h 时水肿百分数达到83.01％（P0.05）；SAH+利多卡因+亚低温4h 组与 SAH 组比，48h 时水肿百分数达到80.96％（P0.05）；SAH+利多卡因+亚低温6h 组与 SAH 组比组比，48h 时水肿百分数达到78.74％（P0.05）；SAH+利多卡因+亚低 温2h 组与 SAH+利多卡因+亚低温6h 组比 P0.05；SAH+利多卡因+亚低温4h 组与 SAH+利多卡因+亚低温6h 组比 P0.05；差异具有统计学意义。 4、血脑屏障渗透性测定结果：与对照组相比，SAH 组血脑屏障破坏明显，48h 时测定皮层脑组织 EB 含量达到20.34ng/mg（P0.05）；与 SAH 组相比，SAH+利多卡 因+亚低温2h 治疗组48h 时测定皮层脑组织 EB 含量17.78ng/mg（P0.05）；与 SAH 组 相比，SAH+利多卡因+亚低温4h 治疗组48h 时测定皮层脑组织 EB 含量15.02ng/mg （P0.05）；与 SAH 组相比，SAH+利多卡因+亚低温6h 治疗组48h 时测定皮层脑组织 EB 含