凌霄花总黄酮对小鼠脑缺血模型的影响-中药学专业论文.docxVIP

目 录 摘 要 1 ABSTRACT 3 前 言 5 第一部分 凌霄花总黄酮对小鼠脑缺血再灌注模型的影响 7 1 实验材料 7 1.1 药物和试剂 7 1.2 仪器 7 1.3 实验动物 8 2 实验方法 8 2.1 造模与方法 8 2.2 观察指标 8 2.3 统计学处理方法 11 3 实验结果与小结 11 3.1 实验结果 11 3.1.1 对小鼠脑缺血再灌注模型脑匀浆中 NOS 活力及死亡率的影响 11 3.2 小结 16 第二部分 凌霄花总黄酮对小鼠血瘀合并缺血再灌注模 型的影响 17 1 实验材料 17 1.1 药物及试剂 17 1.2 实验仪器 18 1.3 实验动物 18 2.实验方法 18 2.1 造模与方法 18 2.2 观察指标 19 2.3 统计学处理方法 19 3 实验结果和小结 19 3.1 实验结果 19 3.2 小结 26 讨 论 27 1 对脑缺血的认识 27 2 凌霄花与脑缺血 29 3 动物模型及指标选择依据 29 3.1 动物模型的复制： 29 3.2 指标选择依据 30 4 对实验结果的讨论 31 4.1 动物死亡原因分析： 31 4.2 对血液流变学的影响 32 4.3 对病理形态学的影响 32 4.4 对 NO 水平、iNOS 和 TNOS 活力的影响 33 4.4 对 ATP 酶活性的影响 33 结 论 35 参考文献 37 附 录 41 附录 1 病理照片 41 附录 2 文献综述 53 摘 摘 要 凌霄花总黄酮对小鼠脑缺血模型的影响 凌霄花总黄酮对小鼠脑缺血模型的影响 PAGE PAGE 13 PAGE PAGE 10 摘 要 目的：观察凌霄花总黄酮对小鼠脑缺血再灌注模型和小鼠血瘀合并脑缺血 再灌注模型的干预作用。通过观察凌霄花总黄酮对实验小鼠血液流变学指标（全 血黏度）、脑组织中一氧化氮合酶（NOS）活性、诱导型一氧化氮合酶（iNOS） 活性、一氧化氮（NO）水平及 ATP 酶活力的影响，并观察脑组织形态学变化， 探讨凌霄花总黄酮对小鼠脑缺血模型的干预作用及特点。 方法：小鼠脑缺血再灌注模型：采用阻断双侧颈总动脉血流 10min，恢复 灌流 10min，再次阻断双侧颈总动脉 10min 方法，复制小鼠脑缺血再灌注损伤 模型。手术前，金纳多组、尼莫地平组、大、中、小剂量凌霄花总黄酮组分别 灌服相应药物，空白组和模型组灌服同体积 0.1%CMC。每天给药一次，连续 给药 11 天，于第 11 天给药后 1h 造模，术后 24h 取材。取脑测定脑组织中 NOS 活性、NO 水平以及 Na+-K+-ATPase、Mg++-ATPase 和 Ca++-ATPase 活力，HE 染 色观察脑组织形态学变化。 血瘀合并脑缺血再灌注模型：小鼠每天肌肉注射地塞米松 0.8mg/kg，连续 注射 15 天造血瘀模型。造模同时，尼莫地平组、华佗再造丸组、大、中、小凌 霄花总黄酮组分别灌服相应药物，空白组、手术模型组、血瘀模型组和血瘀加 手术模型组灌服同体积 0.1%CMC，每天给药一次，连续给药 16 天。于第 16 天 给药后 1h，夹闭双侧颈总动脉 10min，恢复灌流 10min，再次夹闭双侧颈总动 脉 10min，恢复供血，缝合小鼠，术后 24h 取材。分别测全血黏度、脑组织中 Na+-K+-ATPase、Mg++-ATPase 和 Ca++-ATPase 活力、NO 水平以及 NOS 活力，HE 染色观察脑组织形态学变化。 结果：小鼠脑缺血再灌注模型、小鼠血瘀合并脑缺血再灌注模型均复制成 功。小鼠脑缺血再灌注模型组小鼠脑匀浆中 ATP 酶表达显著降低；脑匀浆中 NO 水平、NOS 活性显著升高并且脑组织病理损伤显著加重。小鼠血瘀合并脑缺 血再灌注实验中血瘀加手术模型组、血瘀模型组、手术模型组小鼠全血黏度高、 中、低切均显著升高；血瘀加手术模型组、手术模型组小鼠 脑匀浆中 ATP 酶表 达显著降低，NO 水平、NOS 活性显著升高并且脑组织病理损伤显著加重。 凌霄花总黄酮能显著降低实验小鼠全血粘度（高、中、低切）；显著降低脑 组织中 NO 水平、NOS 活性，显著升高脑匀浆中 ATP 酶活力，并能显著减轻脑组 织的病理损伤程度。其中以大剂量凌霄花总黄酮组对小鼠脑缺血再灌注及小鼠 血瘀合并脑缺血再灌注所致损伤的改善作用最优。 结论：凌霄花总黄酮可通过改善血液流变性（降低全血黏度）、提高