实验六、消化道运动及小肠平滑肌特性(精).pptVIP

实验六、消化道运动及小肠平滑肌特性 【目的要求】 1、观察胃肠道的各种形式的运动。 2、通过观察各种因素对离体小肠平滑肌运动的影响,加深对平滑肌生理特性的了解。 3、学习动物离体组织器官灌流的实验方法。 【基本原理】 消化道平滑肌具有自动节律性，可以形成多种形式的运动，主要有：紧张性收缩、蠕动、分节运动及摆动。在整体情况下，消化道平滑肌的运动受到神经和体液的调节。兔的胃肠运动活跃且运动形式典型，是观察胃肠运动的好材料。 在一定时间内，离体小肠平滑肌在适宜的环境中仍可保持其生理活性。本实验将离体小肠置于模拟内环境（离子成分、晶体渗透压、酸碱度、温度、氧分压等方面类似于内环境）中，观察当模拟内环境因素发生变化时，离体小肠平滑肌运动的变化。该实验方法不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性，而且还可用来测定微量化学物质或药物的生物学特性。 【动物、器材与试剂】（以下是每组所需的种类和数量） 兔、台氏液、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、1%CaCl2溶液、1mol/L HCl、1mol/L NaOH、恒温平滑肌浴槽、二道生理记录仪、张力换能器、哺乳动物手术器械一套、注射器、纱布、棉线、丝线、万能支架、螺旋夹、双凹夹、温度计、细塑料管(或L形通气管)、长滴管、增氧泵。 【方法与步骤】 1、恒温平滑肌槽装置的准备。向中央标本槽内加入台氏液至浴槽高度的2/3处。外部容器为水浴锅加自来水。启开电源，恒温工作点定在38℃。将浴槽通气管与增氧泵相连接，调节橡皮管上的螺旋夹，使气泡一个接一个地通过中心管，为台氏液供氧。 2、正常情况下胃肠运动形式的观察。向耳缘静脉注射空气(或用木棒猛击兔的后脑部)使其致死，将兔背位固定于手术台上，腹部剪毛后，沿正中线切开皮肤和腹壁，观察相对正常情况下胃肠运动的形式，注意胃肠的蠕动、逆蠕动和紧张性收缩，以及小肠的分节运动等。在幽门与十二指肠的接合部可观察到小肠的摆动。 3、标本制备。找到胃，以胃幽门与十二指肠交界处为起点，快速沿肠缘剪去肠系膜，然后再剪取20～30cm长的十二指肠，置于4℃左右的温台氏液中轻轻漂洗，可用注射器向肠腔内注入台氏液冲洗肠腔内壁，并置于低温(4～6℃)台氏液中备用。实验时将肠管剪成2～3cm的肠段，用棉线结扎肠段两端，将一端结扎线连于浴槽内的标本固定钩上，另一端连于张力换能器，适当调节换能器的高度，使其与标本之间松紧度合适。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦。 4、仪器连接与调试。（图12） 5、实验项目（图13） (1)观察、记录38℃台氏液中的肠段节律性收缩曲线。 (2)观察、记录25℃台氏液中的肠段节律性收缩曲线。 (3)待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在38℃后，加1:10000肾上腺素1～2滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作用后，用预先准备好的新鲜38℃台氏液冲洗三次。 (4)待肠段活动恢复正常后，再加1:10000乙酰胆碱1～2滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变。作用出现后同上法冲洗肠段。 (5)向中央标本槽内加入1mol/L NaOH溶液1～2滴，观察肠段收缩曲线的改变。作用出现后同上法冲洗肠段。 (6)向中央标本槽内加入1mol/L HCl溶液1～2滴，观察肠段收缩曲线的改变。待作用出现后同上法冲洗肠段。 (7)向中央标本槽内加入1%CaCl2溶液2～3滴，观察肠段收缩曲线的改变。 【注意事项】 1、胃肠在空气中暴露时间过长时，会导致腹腔温度下降。为了避免胃肠表面干燥，应随时用温台氏液或温生理盐水湿润胃肠，防止降温和干燥。 2、实验动物先禁食24h，于实验前1-2h喂食，然后处死,取出标本，肠运动效果更好。 3、标本安装好后，应在新鲜38℃台氏液中稳定5～10min，有收缩活动时即可开始实验。 4、注意控制温度。加药前，要先准备好更换用的新鲜38℃台氏液，每个实验项目结束后，应立即用38℃台氏液冲洗，待肠段活动恢复正常后，再进行下一个实验项目。 5、实验项目中所列举的药物剂量为参考剂量，若效果不明显，可以增补剂量，但要防止一次性加药过量。 6、供氧的气泡过大过急都会使悬线振动，导致标本较大幅度地摆动而影响记录。 【思考题】 1、正常情况下，食道、胃、小肠和大肠有哪些运动形式？ 2、分析乙酰胆碱、肾上腺素、阿托品及新斯的明对小肠平滑肌收缩活动的影响。 3、描述温度变化对小肠平滑肌收缩活动的影响，分析原因。 4、Ca2+在平滑肌收缩中起什么作用？ * *