磷酸化蛋白质-生物探索.ppt

2．液相色谱电喷雾串联质谱 串联质谱测定糖蛋白的氨基酸序列 对于已知蛋白，用串联质谱的方法，可以测定蛋白质氨基酸序列中间某一片段，从而判断其序列与理论序列是否一致，这一方法完全可以被延伸至糖蛋白的一级结构分析中来，可以将糖蛋白酶切后的肽段，包括含糖肽段，在串联质谱上直接选择离子进行碰撞活化，从而分析选择肽段的氨其酸序列，得到糖蛋白的一级结构信息。 糖链结构的分析 随着电喷雾申联质谱仪器的发展，目前最直接的分析糖链结构的方法是应用串联质谱的母离子扫描(parent ion scan)技术，选择特定的糖链离子．经碰撞活化室用惰性气体将其打碎，从而推断糖链结构。 3.凝集素在糖蛋白分析中的应用 凝集素不但可用于寡糖或糖复合物的分离纯化，也可用于糖链的结构分析，比如：伴刀豆球蛋白(ConA)对高甘露糖型N-糖链有专一性；麦胚凝集素(WGA)却对杂合型N-糖链有专一性；而亲和核心岩藻糖类糖链应选用兵豆凝集素等。以核糖核酸酶B为例，用比ConA提取其高甘露糖型糖链。 六、小结 蛋白质的翻译后修饰，包括糖基化，对于发生在生物学体系中的新陈代谢具有控制作用，多糖结构中存在着可利用的广泛的差异性．这些差异性对于新陈代谢的调节细致入微。2D展示的糖蛋白阵列为我们提供了一个谱图，由它我们可