试验4小动物迷宫试验检测方法一.pptVIP

实验4 小动物迷宫实验检测方法 一、实验目的 1、学习小白鼠学习记忆行为检测方法 2、学习MT-200 Morris水迷宫跟踪系统的使用方法。 二、实验原理 80年代初由英国心理学家Morris设计的，用于检测动物空间搜索和辨别的学习记忆能力，水迷宫箱内盛一定量的水，供动物在其中游泳。箱的某处装置一隐匿小站台，动物游泳到此可以在其上休息，经过多次训练获得记忆。 三、实验器材 小白鼠 MT-200 Morris水迷宫跟踪系统 四、实验步骤 1. 实验仪器 MT-200型Morris水迷宫由一不锈钢制成的圆柱形水池和一可移动位置的圆柱形透明有机玻璃平台组成，水池直径80 cm，高50 cm。 实验中水池水深25 cm，(高出平台1cm)，溶入500 g速溶奶粉，混匀（目的是遮挡平台）； 水温控制在(25 ± 0.5)℃,在水池边缘上等距离设四个标记点（入水点），将水池均等的分为4个象限，平台置于第二象限，在水池第四象限（平台对面象限）周边壁上做明显标志物，与第二象限平台连线为圆形水池一直径。 水池上方通过一摄像机与监视计算机连接，利用计算机软件对动物的活动进行全程跟踪，实验软件可记录小鼠游泳轨迹，找到平台所需的时间即潜伏期，寻找平台所采取的策略，初始角度，各象限游泳距离，原平台象限游泳距离与总距离之比等等指标。 2. 实验程序 Morris水迷宫测试程序包括 定位航行试验和空间搜索试验两部分。 2.1定位航行试验 历时2天，每只小鼠每天接受8次找平台训练，分两个训练周期（上午和下午），每个训练周期4次，每次对应一个象限； 小鼠先从第四象限入水点（平台对面象限）入水，再依次从第一、三象限入水点入水，最后从第二象限（平台象限）入水点入水，每次训练2 min。 将动物面朝池壁轻轻放入水中，同时启动记录装置，开始记录。 动物找到并爬上平台后，让其停留20 s，若动物入水2 min内未能找到或爬上平台，则将其放置于平台上站立20 s。之后，将动物从平台上取下休息2 min，再进行下一次训练，记录小鼠寻找到隐藏在水面下平台的时间即逃避潜伏期(escape latency)。 2.2空间搜索试验 在定位航行试验后进行（第二天），去除平台，然后从第四象限入水点（原平台对面象限）将小鼠放入水中，记录其在一定时间内（2min）的游泳轨迹，考察小鼠对原平台的记忆，记录小鼠在各象限的游泳时间，比较在第二象限（原平台所在象限）停留时间。 Morris软件的使用 1、新建项目(存盘-实验只数-小鼠-120s)（定位航行试验和空间搜索试验 ） 2、场景设定 3、确定平台（1.5倍） 4、系统定标（80cm） 5、保存项目 附：Y－迷宫实验方法 实验原理： 二十世纪60年代末期发展起来。由于可很好地检测空间和非空间辨别记忆而得到广泛应用。惩罚或奖励因素：电击或食物。在一个Y型三臂迷路内，分安全区和电击区。给小鼠电击刺激，迫使它逃避并获得迅速找到安全区的记忆力，这类实验主要是观察动物空间辨别或明暗辨别的学习和记忆能力 。 实验装置： 小鼠用Y型迷宫箱有三个相等的支臂，用不透明塑料或木板制作，相邻各臂间的夹角为120度，三等分辐射式，三臂长×宽×高为18cm×8cm×15cm。底部铺有直径1mm的铜栅，间隔3－5mm，连接一调压变压器以通电，常用电击电压为36－40V。 在各臂末端的装一25W信号灯，信号灯打开指示该臂为安全区，即该臂底部不通电。安全区的方位可以随即转换，当某臂为安全区时，另外两臂和连接区均带有刺激电压，可训练动物学会主动逃避反应，逃向安全区。 箱顶装透明有机玻璃盖以便观察。 Y型迷宫的控制仪面板有电压控制按钮、延时控制按钮和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、0四个琴键，当分别按下Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ键时，相应臂的信号灯亮，此时该臂不通电为安全区，另外无灯光的两臂及交界区均通电而成为非安全区(电击区)。按下0键，则三臂均不通电，但交界区通电。 实验程序 1. 适应 ：实验前将动物放入迷宫内，使之适应3分钟。 2. 训练：以小鼠所在的臂为起始臂，另外两条臂的其中一条臂启动灯光信号，延迟 5 s 后没有灯光信号的两条臂（起始臂和另外一条臂）通电电击小白鼠，电击电压为 36 V ，直到小鼠逃避到安全区（有灯光信号的臂）为止，灯光信号持续 10 s 后熄灭，完成一次训练。 以小白鼠到达的安全区为下一次测试的起始臂，间隔 20 s后进行下一次训练。以小鼠直接跑向亮区为一次正确反应，每个训练日每只小鼠训练20次。连续2天。 3. 重测试：第三天，检测小鼠记忆能力。记录每只小鼠10次测试中的正确反应次数，以记忆保持率的百分数表示，或记录小鼠达到9/10正确反应的训练次数。 苦味酸染色 苦味酸溶于乙醇。一般用3%—5%苦味酸乙醇溶液，可染成黄色。即取苦味酸3