人教版选修一专题3《植物的组织培养技术》.pptVIP

2、产生花粉植株的两条途径 3、影响花药培养的因素 一、材料的选择： 花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般，月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。 为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。 实验操作 一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养 （一）材料的选取 选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常用的方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 （二）材料的消毒 1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） 5、无菌水冲洗3~5次 用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。 （三）接种和培养 灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。 一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。 影响花药培养的因素 1、主要的影响因素：材料的选择与培养基的组成。 （1）接种的花药时期：一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧时，花药培养成功率最高。选择完全未开放的花蕾，可挑选到单核期的花药，菌少、易消毒；花瓣松动，菌多，消毒困难。 （2）此外，亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度对诱导成功率都有一定的影响。 实验操作 一、材料的选取 1、选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 2、确定花粉发育时期最常用方法：醋酸洋红法；焙花青－铬矾法。 注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，染色体容易被染色。通过染色，可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边期。一般单核靠边期的花药培养成功率最高。 二、材料的消毒 三、接种和培养 四、结果分析与评价 1、能够通过镜检找到处于适宜的发育期的花粉。用醋酸洋红法或焙花青－铬矾法检测单核靠边期的花粉粒。 2、花药出现污染的原因： （1）消毒不彻底；（2）接种室污染；（3）人为因素的交叉污染等。 3、略。 2、植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处是：培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。两者不同之处在于：花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾，花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基，对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药培养的难度大为增加。 * 学习目标 1.回顾植物组织培养的基本原理和该技术在生产中的 应用。 2.初步掌握植物组织培养过程中使用的无菌技术。 3. 掌握植物组织培养和花药培养的基本过程，特别是 选取适宜的培养材料和培养基。 4.初步掌握影响植物组织培养和花药培养的各种因素。 5. 掌握被子植物花粉发育的过程。 1、细胞的分化 概念： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 持久性、稳定性、全能性 特点： 原因： 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果（遗传信息的执行情况不同） 2、细胞的全能性 概念： 原理： 每个生物细胞都具有发育成完整生物体的潜能的特性 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 受精卵生殖细胞体细胞 全能性的比较: 菊花的组织培养 1、植物组织培养的原理： 植物细胞具有全能性 2、植物组织培养的过程： 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 细胞离体 必要条件： 一定的营养物质、激素和其他外界条件 无菌 （1）植物材料的选择 不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。 同一种植物材料，材料年龄、保存时间长短也会影响实验