绪论(医学细胞生物学).pptVIP

* 三、细胞及亚细胞组分的分离和纯化技术 （一）细胞化学免疫荧光技术 细胞化学: 在保持细胞结构的基础上，利用某些化学物质可与细胞内某些成分发生化学反应，在局部形成有色沉淀物的原理，以示待查物质存在于细胞中的部位。 例如：Feulgen法——显示DNA * 免疫细胞化学（immunocytochemistry）: 根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。 抗原：大分子或与大分子相结合的小分子。 抗体：由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。 如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。 * （二）细胞显微分光光度测定技术 根据细胞内某些物质对光谱吸收的原理，用以测定这些物质如核酸和蛋白质等生物大分子在细胞内的含量。 吸收光谱的波长： 230 ～ 700nm Feulgen染色后的DNA吸收的波长：546nm 细胞显微分光光度测定技术：定位和定量 * （三）流式细胞计量术（FCM） 用氩离子激光发出的激光束为激发光，通过调节液压，迫使悬浮的细胞排成单列，按重力方向流动，当细胞通过激光束检测区时，细胞被激光束照射而向各个方向发出散射光，若经荧光染色的细胞，就会发出一定强度的荧光，仪器的检测系统，就可逐个对细胞的散射光和荧光强度进行测定，并将光信号转变成电信号，由电子控制台放大和显示。 * 测量速度：5 000个细胞/s＋ 8个相关参数 分选出细胞纯度：90～99% 检测的参数：细胞大小、体积、DNA、RNA、总蛋白含量、表面抗原、受体、染色体等 应用：细胞动力学、免疫学、体细胞学、肿瘤的诊断和治疗等。 流式细胞仪特点 * * * * （四）放射自显影术 （五）细胞器的分离与提纯技术 * 四、细胞分子生物学技术 （一）细胞原位分子杂交技术 分子杂交的基本原理：碱基的互补配对 原位杂交（in situ hybridization）： 将细胞或组织切片固定在载玻片上，保持细胞中的 DNA和RNA在原位置条件下，与标记的 DNA或RNA分子探针进行原位杂交，通过放射性自显影或显微镜可探测到待查材料中被杂交的分子。直接进行基因定位、定量分析。 * 新兴职业学院 张承建 * 细胞:是生物体结构和功能的基本单位。 细胞生物学(cell biology) 从细胞水平（整体、亚微结构、分子）探讨生命活动规律的科学。 医学细胞生物 学(medical cell biology)： 运用细胞生物学的理论和方法，研究人体的细胞的形态结构和功能等生命活动规律和人类疾病发生、发展及其防治的科学。 第一节细胞学与细胞生物学 自然界千姿百态，生物包罗万象，中学我们学习的是科普知识…现在我们是系统性深入学习，目的是为今后的医学理论和实践打下坚实基础。 1665年英国生物学家胡克发现了细胞，随后学者们建立了传统细胞学：研究细胞化学、组织学、形态结构、及功能的学科。 科学进步，设备发展，技术更新，各学科胶着渗透，致使细胞学研究发生了质的改变。表现在整体到微观、形态到功能、表象到本质、临床到机制等各个方面。细胞生物学是：应用现代物理化学、分子生物学方法技术，从细胞整体，显微、到亚显微和分子水平上研究细胞结构、功能及生命活动规律的学科。其内容包括质膜、细胞质和细胞核的结构功能及其相互关系，细胞总体和动态的功能活动（生长、分裂、分化、生殖、遗传等）以及这些相互关系和功能活动的分子基础。 * 细胞生物学的重要性主要在于，细胞生物学和分子生物学之间；分子生物学和个体生物学之间；相互衔接相互渗透，它们之间的关系对今天的医学，药物学，生物化学等生命学科起着核心支柱，承上启下的重要作用。 医学细胞生物学：是应用细胞生物学的理论和方法，研究人体细胞核形态结构与功能活动规律和人类疾病发生，发展及其防治的学科。 * 第二节、细胞生物学的发展史（五个阶段） 一、萌芽阶段 1590年荷兰人发明显微镜 1665年英国人发现细胞 1673年——1677年发现一些细胞器结构 这一时期，设备和技术的发展缓慢，所以只是萌芽阶段。 二、学说建立阶段 1839年德国植物学家总结：一切生物由细胞组成，细胞是生物的形态结构和功能活动的基本单位。 1858年德国病理学家提出：机体的一切病理表现都给予细胞的损伤。 以上的要点在：?生物是细胞组成，是多细胞生物的基本单位。?细胞是生物的结构和功能单位。?细胞来源与细胞。 三、经典细胞学阶段