急性冠脉综合征患者血小板表面CD40L及血清sCD40L变化研究.docVIP

急性冠脉综合征患者血小板表面CD40L及血清SCD40L变化 研究 张丹1王姝丽2(1长春市中心医院心血管内科130051;2山东省立医院保健老 年心血管科250021) R446.1 A 1672-5085 (2010)35-0027-03 目的 探讨血小板表面CD40L和血清可溶性CD40L(SCD40L)与急性 冠脉综合征(ACS)的关系。方法 选取ACS患者32例(心肌梗死14例、不稳 定心绞痛18例)，稳定性心绞痛患者13例，同时选取10例健康成人作对照。分 别应用流式细胞术和ELISA法测定血小板表面CD40L及血清SCD40L水平。随访 ACS患者1月，测定其血清SCD40L水平。结果FCM测定结果显示，AMI组和 UA组血小板表面CD40L表达水平明显高于SA组及对照组(Plt;0.05), UA组 CD40L水平显著高于AMI组(Plt;0.05), SA组与对照组比较无显著差别；ELISA 测定血清SCD40L结果显示，AMI组和UA组血清SCD40L表达水平明显高于SA 组及对照组(Plt;0.05)o AMI组SCD40L水平显著高于UA组(Plt;0.05), SA与 对照组比较无显著差别。结论 急性冠脉综合征患者血小板表面CD40L表达增加， 血清SCD40L水平升高，因此CD40L可能成为预测斑块稳定状态的一个指标。 关键词 CD40L CD40急性冠脉综合征 急性冠脉综合征(acute coronary syndrome, ACS)约占冠心病总数的30%, 是引起冠心病病人死亡的主要原因。CD40L属于肿瘤坏死因子超家族(TNF),主 要表达于活化的CD4+T淋巴细胞、部分活化的CD8+T淋巴细胞、嗜碱性粒细胞、 肥大细胞，NK细胞也有表达。CD40L与CD40交联可以调节B细胞的活化、分 化和免疫球蛋口(lg)类别转换，并可以促进B细胞的产生，挽救凋亡的B细胞。 在动脉粥样硬化(AS)形成的初期及病变进展阶段，粥样斑块内可以发现大量激 活的巨噬细胞及CD4+T细胞表面表达CD40Lo此外，CD40L可共同表达于与AS 发生发展密切相关的细胞上，如人血管内皮细胞、平滑肌细胞及巨噬细胞，促进 这些细胞分泌细胞间粘附分子-1 (ICAM-1)^ E■选择素、白细胞介素(IL?lbeta;、 IL?8等)及肿瘤坏死因子(TNF)等导致AS的进展，促进斑块不稳定，发展成为 ACS[1,3]。但0前关于血小板表面CD40L的生物学功能及其与ACS发生发展关系 方面的研究报道较少。本研究的目的在于通过检测并随访ACS患者血小板表面 CD40L及血清SCD40L的水平，探讨血小板表面表达CD40L与ACS的关系。 1材料与方法 1.1主要试剂与仪器FITC标记的鼠抗人CD40L单克隆抗体、FITC标 记的Ig2alpha;单克隆抗体、PE标记的CD61单克隆抗体购自美国EB公司；人 SCD40L ELISA检测试剂盒为美国Alexis生物公司产品。流式细胞仪(FACS can型) 产自美国(BECTON DICKINSO)。 1.2研究对象 本研究所选对象均为2001年11月至2002年9月于吉 林大学第二医院心内科住院病人。根据WHO1979年制订标准并参考1997年欧 洲心脏学会(ESC)和美国心脏病学院(ACC)联席会议提出的诊断指南，分为 AMI、UA及SA三组，AMI组14例病人包括12例Q波心肌梗死及2例非Q波心 肌梗死，UA组18例包括初发性心绞痛、恶化劳力性心绞痛、自发性心绞痛、梗 塞后心绞痛(不包括变异性心绞痛)。SA组13例，6个月内胸痛发作频率、强度、 诱因无明显变化。10例正常对照组，为健康成人体检者，年龄、性别、吸烟等 因素与病例组相匹配。 排除标准除外贫血、炎症，恶性肿瘤、胶原系统疾病、甲状腺功能亢 进、血栓性疾病、外伤等非心脏性疾病。同吋除外冠心病以外的其它心脏疾病、 心衰、二尖瓣关闭不全、旁路移植术后及3个月内行溶栓治疗者。 1.3样本采集及处理 病人入院48 h内，采肘静脉血2 ml,加入含106 mmol/L枸椽酸钠的抗凝塑料管中，即刻送实验室。同时抽取静脉血2 ml置于试 管中，放置lh,而后以4°C 1500转/分离心10 min,取上清。血清储存在一80°C 冰箱待测。 1.4全血流式细胞术(FCM)检测血小板CD40L用CD61标记血小板， 以FITC标记的Ig2alpha;作为同型对照用FCM检测血泪小板表面CD40L。 1.5 ELISA法检测血清SCD40L本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测 血清sCD40Lo按试剂盒提供的操作说明书进行检测。以标准品浓度作横坐标， 0D值作纵坐标，建立标准曲线，并根据样品的0D值在标准曲