红星草棉-澳洲棉双二倍体的鉴定与基因组DNA甲基化的MSAP检测.pdfVIP

红星草棉-澳洲棉双二倍体的鉴定与基因组DNA胞嘧啶甲基化的MSAP检测 探针进行原位杂交，在根尖细胞的分裂相中检测到了26个染色体信号，证实了新合 成双二倍体的一个染色体组就是澳洲棉的G2染色体组。通过对S1植株花粉母细胞进 行减数分裂中期I的染色体数目和配对情况的显微镜检，发现在所观察的49个花粉母 细胞减数分裂中期I普遍都存在2．4个单价体，个别还出现了三价体，只有两个花粉 母细胞的染色体是完全配对成26个二价体。染色体的不完全配对干扰了减数分裂的 顺利进行，是导致S1植株花粉育性较低的主要原因。 为研究新合成的双二倍体材料在经历染色体组的重组和加倍之后，基因组DNA 甲基化修饰所表现出来的变化，我们通过嫁接扩大群体然后分别进行干旱和低温胁迫 处理，利用MSAP技术对基因组DNA的胞嘧啶甲基化修饰进行了初步的摸索性研究。 红星草棉、澳洲棉和杂种F1、sl、s2五个材料的整体胞嘧啶甲基化水平为 47．40～55．09％，表现出较大的时空条件差异性。杂种后代的基因组DNA的甲基化信 息主要遗传于两个亲本共有的CCGG位点的甲基化信息，变异位点多发生在两个亲本 特有的CCGG位点甲基化信息，各个杂种后代总的甲基化变异频率，随着染色体组的 加倍和世代增加而逐渐降低，甲基化的修饰呈现一个逐渐稳定的变化。杂种后代在应 对干旱和低温胁迫时，其甲基化的修饰主要体现在不同亲本来源的甲基化遗传模式的 遗传率的动态调整，其中s2植株较其他四个材料更能保持甲基化的稳定。 本研究通过对新合成的红星草棉～澳洲棉双二倍体材料的细胞学鉴定和形态表 型调查，对其做了系统的鉴定，确认了其作为新合成的双二倍体的事实。同时利用 MSAP技术对新合成的双二倍体材料及其两个亲本材料进行了全基因组DNA甲基化 修饰的初步研究。本研究结果为转育澳洲棉“植株有腺体——种子无腺体，’．陧状进入陆 地棉栽培种的可能性提供了参考，MSAP实验结果对于开展后续研究做了适当的探索， 对了解全基因组DNA甲基化修在四倍体棉花形成初期，异源四倍体内部的染色体互 作压力和外在的环境胁迫压力对新合成的异源四倍体的稳定和塑造作用中，所发生的 一些变化，具有一定的参考意义。 关键词：澳洲棉；红星草棉；异源四倍体；腺体；DNA甲基化； 万方数据 ABSTRACT --v．COFITAEHTNYS IDENTIFICATION NE，W G． G．4嬲删LEANDITS HERBACE砌夕AND VARIATIONBYMSAP METHYLATIoN ABSTRACT themost economicduetoitscontribution Cotton(Gossypiumspp．)is important crop isalso usedasoiland of human withnaturaltextilefiber．It widely protein providingbeings of contentof witha levelofoilcontent35-38％and crop high protein for fromtheviewofnutfitional isanexcellentsourceofoiland food point．