反向斑点杂交法快速检测HBV基因型反应条件的优化和建立.pdf

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，２９（１２）：８５～８９ 反向斑点杂交法快速检测ＨＢＶ基因型 反应条件的优化和建立 赵　丽　张文露　胡　源　刘彦辰　赖国旗　杨　凤　黄爱龙 （重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室　重庆　４０００１６） 摘要　利用反向斑点杂交技术，设计出特异性基因分型探针，并将探针固定在带正电荷的尼龙膜 上，与ＰＣＲ扩增带有地高辛标记的临床血清样本进行杂交。通过优化杂交反应条件，建立起简 单、快速、特异地检测ＨＢＶ基因型的方法。利用该方法对重庆地区临床样本进行分型检测，并与 ３ 直接测序结果比较。结果表明新建的ＨＢＶ基因分型方法可对拷贝数在１０以上的血清样本准确 分型，特异性达到９６．６７％。重庆地区感染ＨＢＶ主要以Ｂ型为主。 关键词　反向斑点杂交　ＨＢＶ　基因型　临床样本 中图分类号　Ｑ８１９ 　　乙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＢｖｉｒｕｓ，ＨＢＶ）感染呈世界 法、聚合