老鹰茶正丁醇层化学成分分离及其体外抗炎免疫活性筛选研究中药学专业论文.docxVIP

安徽医 安徽医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 5 4 结果与讨论20 4.1 结果 20 4.2 化合物结构鉴定 20 第二部分 老鹰茶正丁醇层的化合物体外对鼠抗炎免疫活性筛选研究31 1 前言31 2 实验材料31 2.1 动物 31 2.1.1 种属和品系 31 2.1.2 饲养条件 32 2.2 药品与试剂 32 2.2.1 药品 32 2.2.2 试剂及主要溶液配制 32 2.3 仪器与设备 32 3 实验方法33 3.1 大鼠饲养 33 3.2 大鼠腹腔巨噬细胞的培养与检测 33 3.2.1 大鼠腹腔巨噬细胞提取与细胞悬液的制备 33 3.2.2 IL-1 的产生与检测 33 3.2.2 PGE 2 的产生与检测 34 与检测3.2.2 TNF-а的产生 与检测 3.3 剂量设置 35 3.4 统计学处理 35 4 实验结果35 4.1 对大鼠腹腔巨噬细胞产生 IL-1 水平的影响 35 4.2 对大鼠腹腔巨噬细胞产生 PGE2 水平的影响 36 4.3 对大鼠腹腔巨噬细胞产生 TNF-а水平的影响 37 5 讨论39 结 论41 参考文献43 附 图46 附录66 致谢67 综 述68 PAGE PAGE 10 英文缩略词表 (Abbreviation) 英文缩写 13C-NMR 英文全称 nuclear magnetic resonance of carbon spectra 中文全称 核磁共振碳谱 1H-NMR nuclear magnetic resonance of hydrogen spectra 核磁共振氢谱 A absorbance 吸光度 AA adjuvant arthritis 佐剂性关节炎 AlCl3 aluminum trichloride 三氯化铝 C concentration 浓度 D day 天 DAD diode array detection 二极管阵列检测器 ELISA enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附测定 FCS fetal calf serum 小牛血清 H hour 小时 HPLC high performance liquid chromatography 高效液相色谱法 IC50 50％concentration of inhibition 半数抑制浓度 IL-1 interleukin-1 白细胞介素-1 Ip intraperitoneal injection 腹腔注射 LPS lipopolysaccharide 脂多糖 LC Litsea coreana leve.var. 豹皮樟 MS mass spectrogram 质谱 NaOH sodium hydroxide 氢氧化钠 NS normal sodium 生理盐水 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PGE2 prostaglandin E2 前列腺素 E2 PM peritoneal macrophage 腹腔巨噬细胞 RA rheumatic arthritis 类风湿性关节炎 RIA radiommunoassay 放射免疫分析 TFLC total flavonoids of Litsea coreana L 老鹰茶总黄酮 TNF-α tumor necrosis factor α 肿瘤坏死因子 α TLC thin layer chromatography 薄层色谱法 UV μl ultraviolet spectrophotometry microliter 紫外分光光度法 微升 老鹰茶正丁醇层化学成分分离及其体外抗炎免疫 活性筛选研究 研究生 张义龙 导 师 李 俊 教授 (安徽医科大学药学院，合肥，230032) 中文摘要 老鹰茶是樟科木姜子属毛豹皮樟（Litsea coreana L.）的叶，俗称老鹰茶，分 布于贵州、四川、安徽等地，其嫩茎叶作饮料，是我国南方各民族民间长期饮用 的一种植物代用茶。近年来药理学研究表明豹皮樟具有抗氧化、降糖、降脂、抗 炎及免疫调节等功效，其作用机制也逐渐得到阐明。化学研究表明豹皮樟含有黄 酮、皂苷、有机酸、香豆素和鞣质等成分，其中黄酮类成分含量高，且是其活性 主要成分。我们曾经对豹皮樟的正丁醇部分进行化学成分研究，分离得到槲皮素、 山柰酚、(+)-儿茶素、?-谷甾醇、胡萝卜苷、槲皮素-3-O-?-D-半乳糖苷、槲皮素 -3-O-?-D-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-?-D-半乳糖苷、山柰酚-3-O-?-D-葡萄糖苷、等 化合物。本文继续对老鹰茶正丁醇萃取部分的化学成分进行分离、纯化和结构鉴 定；对分离得到的单体化合物