抗钠泵α2亚单位截断性片段多肽抗体的制备与鉴定.pdfVIP

·168 · doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2015.02.03 J South Med Univ, 2015, 35(2): 168-173 基础研究 抗钠泵抗钠泵αα22 亚单位截断性片段多肽抗体的制备与鉴定亚单位截断性片段多肽抗体的制备与鉴定 张明娟，张美程，朱参战，张超英，段宗明 西安交通大学医学院第二附属医院心内科，陕西 西安 710004 摘要：目的采用多肽制备技术和免疫学技术制备抗钠泵α2 亚单位截断性片段及其抗体，为检测和研究钠泵α2 亚单位的组织学 分布及其功能研究提供实验基础。方法 根据NCBI-Genebank 获得大鼠钠泵α2 亚单位M 1~M2 膜外区截断性片段目的多肽 （LAAMEDEPSNDN），采用9-氟甲氧羰基（Fmoc）固相合成法合成目的多肽，并采用碳化二亚胺法制备出多肽与孔戚血蓝素复 合物，免疫新西兰大白兔，免疫4 次后获得抗血清，测定其效价。随后采用protein A 纯化IgG 抗体，并将其用于大鼠主动脉血管 平滑肌细胞钠泵α2 亚单的组织学检测。结果 （1）人工合成的大鼠钠泵α2 亚单位截断性片段长 13 氨基酸残基 （LAAMEDEPSNDN-C），理论相对分子质量：