芒果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B的克隆与敲除载体构建.docVIP

芒果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B的克隆与敲除载体构建 张恺莉1，蒲金基基金项目：国家自然科学基金；公益性行业（农业）科研专项项目：芒果产业技术研究与示范（201203092-2）第一作者：张恺莉（1993—），女，在读研究生，研究方向：植物真菌病害；E-mail: mailto:lxmpll@126.com 1437643342@。 通讯作者：刘晓妹（1973—），女，副教授，研究方向：热带作物真菌病害；E-mail: lxmpll@126.com。 （1 海南大学环境与植物保护学院·海南大学热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室，海南海口 570228；2 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所·农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室，海南海口 571101） 摘 要 芒果炭疽病（Colletotrichum gloeosporioides）是为害芒果的重要病害之一，为了明确内切葡聚糖酶CgEg1B与芒果炭疽病菌致病力的关系，本实验以芒果炭疽病菌DNA为模板，利用同源克隆技术扩增CgEg1B，对其序列特征、蛋白的保守结构域进行分析，并借助In-Fusion? HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建。结果表明，该基因DNA和cDNA全长分别为1077 bp、1020bp，编码区有1个内含子（大小为57bp），推测编码339个氨