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生物素、亲和素标记技术 广州医学院第一附属医院检验科 廖伟娇 一、生物素及其理化性质 1 概念 2 分子式 结构特点 溶解特性 等电点 其它特性 1 概念： 生物素(biotin)是动、植物体内广泛分布的一种小分子生长因子，又名辅酶R或维生素H。 分子式： C10H16O3N2S 分子量：244.31 结构特点： 咪唑酮环/四氢噻吩环 结合亲和素 侧链末端羧基结合蛋白质 溶解特性： 难溶于水，易溶于二甲基甲酰胺(DMF) 等电点： PH=3.5 其它特性： 羧基需经活化修饰才能结合蛋白质 （羧基活化的生物素，称为活化生物素，也叫生物素衍生物） 生物素衍生物的种类及特性： 1 生物素羟丁酰亚胺酯(BNHS)： DMF 制备：生物素 + N-羟基琥珀酰亚胺 二环己基碳二亚胺 标记特点： BNHS中的羧基与蛋白质中的赖氨酸氨基 结合达到标记的目的 适用于：标记Ab、酶、中性或偏碱性Ag、DNA 长臂活化生物素(BCNHS)：