毕业论文 - - microRNA对肉牛肌内脂肪沉积相关基因表达的调控作用研究 .docVIP

毕 业 论 文 （ 2015届本科） 题 目： microRNA对肉牛肌内脂肪沉积 相关基因表达的调控作用研究 学 院： 畜牧兽医学院 专 业： 动物科学 姓 名： 指导教师： 完成日期： 2015年 5 月 6 日 目录 TOC \o 1-3 \h \u 12102 摘要 1 14269 Abstract 2 21631 前言 3 16726 1实验材料与方法 9 10044 1.1试验动物与来源 9 7684 1.1.1 血液样品 9 4272 1.1.2 肌肉组织样品 9 594 1.2试验所需药品和试剂 9 9326 1. 3主要仪器设备 9 7488 1.4主要试剂的配制 10 2247 1.5 DNA的提取 10 10729 1.5.1肌肉组织DNA的提取 10 10831 1.5.2 DNA浓度和纯度的检测 11 6701 1.6引物设计 12 19195 1.7基因目的片段的扩张 12 22980 1.7.1使用TaKaRa Taq酶试剂盒在冰盒上配置25μL体系反应液 12 21310 1.7.2 PCR反应程序 12 17649 1.8序列测定与SNP（单核苷酸突变）定位 13 29324 2 结果与分析 14 30162 2.1筛选得到的mi-RNA的特点 14 4162 2.2 miRNA的分离与靶标结合的特点 15 14210 2.2.1突变前结合的miRNA 15 3685 2.2.2突变后结合的miRNA 17 7382 3结论与讨论 20 25442 参考文献 21 18900 致谢 24 microRNA对肉牛肌内脂肪沉积相关基因表达的调控作用研究 沈阳农业大学学士学位论文 第 第 PAGE 24 页 共 NUMPAGES 27 页 第 第 PAGE 1 页 共 NUMPAGES 27 页 摘要 为了研究microRNA对肉牛肌内脂肪沉积相关基因表达的调控作用，本文通过对辽育白牛肌肉组织DNA的提取、DNA浓度和纯度的检测、基因目的片段的扩张、序列测定与SNP定位这些实验，得到了MiRNA的分离与靶标结合的特点，筛选得到的MiRNA的特点等。实验结果表明，利用在线软件查找牛的miRNA,牛的靶标miRNA库包含1608个相关miRNA，用miRBASE软件将HFABP基因与牛的miRNA结合情况分析后发现6个突变前结合的miRNA包括bta-miR-212 MIMAT0009264，bta-miR-411a MIMAT0009312，bta-miR-2370-3p MIMAT0011915，bta-miR-30f MIMAT0009282，bta-miR-3604 MIMAT0016939，bta-miR-2468 MIMAT0012058，,6个突变后结合的miRNA包括bta-miR-421 MIMAT0009314，bta-miR-484 MIMAT0003535，bta-miR-2355-5p MIMAT0011891，bta-miR-2413 MIMAT0011975，bta-miR-2461-3p MIMAT0012048，bta-miR-2474 MIMAT0012065。筛选得到的RNA测序后通过基因序列与波峰的比对发现，在H-FABP基因3′-UTR区发现了1个差异位点，170bp位点A/T的突变。microRNA广泛存在于单细胞和多细胞的真核生物中，并在真核基因表达调控中有着重要的作用，它对信号传导、细胞代谢和凋亡、肌细胞生成、病毒感染和癌症等方面影响显著，因此受到了越来越多的关注。本文对microRNA分子及其对动物肌肉发育和脂质代谢的调控以及在一些动物疾病中的作用等进行研究，为今后动物microRNA的研究提供理论依据。 关键词：MicroRNA；肌内脂肪；基因；肉牛 Abstract In order to study microRNA on beef intramuscular fat deposition related to the regulation of gene expression, the paper extraction Lia