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- 2019-06-03 发布于浙江
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生物工程导论
1、生物工程的研究对象包括活的生物体或它们的一部分。
2、基因工程中一般都使用松弛型质粒载体。两种常用的质粒载体为pBR322和pUC19.
3、用于原核生物宿主的载体:①质粒载体。②噬菌体载体。③柯斯质粒:用于真核生物宿主的人工载体大多具有大肠杆菌质粒的耐药性或噬菌体的强感染力,同时还应满足携带真核生物目的基因大片段DNA的要求。
4、质粒载体:①质粒载体pBR322(原核质粒常见)②pUC19
5、用于真核生物宿主的载体:①YIP载体。②YRP载体。③YAC载体。④其他质粒:BAC是以细菌F因子为基础组建的细菌克隆体系。
6、用于植物宿主的载体:①Ti质粒。
7、基因组文库的筛选:⑴DNA杂交法。双链DNA分子可以通过热处理或碱变性的方法变性成单链DNA分子。加热后缓慢冷却的过程称为退火。退火后有的DNA分子的两条链分别来自于不同的DNA分子,即形成了杂合DNA分子。⑵免疫反应法:若一个目的基因DNA序列可以转录和翻译成蛋白质、那么只要出现这种蛋白质,甚至只需要该蛋白质的一部分,就可以用免疫的方法检测。⑶酶活性法:如果目的基因编码一种酶,而这种酶又是宿主细胞所不能编码的,那么就可以通过检查酶活性来筛选目的基因的重组子。
8、将外源重组分子导入受体细胞的方法很多,其中转化(转染)和转导主要适用于原核的细菌细胞和低等的真核细胞(酵母),而显微注射和电穿孔则主要应用于高
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