酸水解对DNS法测定甜高粱中总糖的影响分析-农业机械学报.pdf

２０１４年９月 农 业 机 械 学 报 第４５卷 第９期 ｄｏｉ：１０．６０４１／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００１２９８．２０１４．０９．０３２ 酸水解对ＤＮＳ法测定甜高粱中总糖的影响分析 １，２ １，２ １，２ 张成明 　姜　立 　李十中 （１．清华大学核能与新能源技术研究院，北京 １０００８４；２．北京市生物燃料工程技术研究中心，北京 １０００８４） 摘要：分析了酸水解对ＤＮＳ法（３，５ｄｉｎｉｔｒｏｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｍｅｔｈｏｄ）测定甜高粱中总糖产生影响的原因。通过对甜高粱 浸提液水解后的糖组分检测发现：６ｍｏｌ／Ｌ盐酸与糖液按体积比２∶１混合，沸水浴３０ｍｉｎ会造成果糖完全分解。在 这种条件下，利用ＤＮＳ法测定葡萄糖、果糖和蔗糖时，测量值分别为理论值的１００％、２５％和５２２％。同时，果糖 水解后的溶液会在高压液相图谱上出现葡萄糖伪峰，造成葡萄糖测定值偏高。酸浓度、水解时间以及水解温度均 会对果糖与蔗糖的测定产生影响。实验结果表明：果糖在酸水解过程中发生分解是造成ＤＮＳ法测定甜高粱中总糖 产生误差的原因。采用ＤＮＳ法测定含有果糖与蔗糖的原料总糖时，需要在保证蔗糖完全水解的情况下果糖不被破 坏，否则会造成测定的不准确。 关键词：甜高粱　总糖　３，５二硝基水杨酸　酸水解　果糖　蔗糖 中图分类号：ＴＫ６；Ｑ５０３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００１２９８（２０１４）０９０１９９０５ 外研究者的普遍认可，具有测试周期短，设备要求简 　　引言 单的特点，可以进行大批量测定。但是，该方法仅可 随着化石资源日益枯竭以及人们对环境问题的 以直接测定原料中的还原糖（葡萄糖和果糖），在测 日益重视，清洁的可再生能源在世界范围内引起了 定总糖时，需要对原料进行酸水解后再进行测定。 广泛关注。２０１２年全球生物燃料产量９４２０万ｔ，销 但是，不同文献报道的酸水解条件差异较大［８－１２］。 ［１］ 售额９５２亿美元，其中，燃料乙醇占８０％以上 。 实验发现，样品经酸水解后，再通过ＤＮＳ法或ＨＰＬＣ ［２］ 法测定总糖时，经常会出现一些偏差。酸水解过程 在燃料乙醇生产中，原料成本是主要生产成本 ， 原料利用率在乙醇生产过程中至关重要，这就要求 极有可能是造成测定结果出现偏差的原因，本文对 原料中可发酵成分的检测方法具有高度的准确性。 酸水解过程影响测定结果的原因进行分析，以期为 目前，我国生产燃料乙醇的原料主要有淀粉质原料 甜高粱糖分标准检测方法的建立提供参考。 （如木薯、玉米、小麦等）和糖质原料（如甘蔗、甜菜 １　材料与方法 等），其原料成分分析方法均已建立，并制定了相应 的国家标准或行业标准［３－７］。甜高粱作为一种新兴 １１　实验材料与仪器 且极具工业应用前景的糖质原料，其糖分测定的标 无水葡萄糖（ＡＲ，西陇化工股份有限公司）、 准方法仍未建立。 Ｄ果糖（Ａｍｒｅｓｃｏ；ＨｉｇｈＰｕｒｉｔｙＧｒａｄｅ；纯度９９０％以 甜高粱中糖分包括蔗糖、葡萄糖和果糖，其比例 上）、蔗糖（Ａｍｒｅｓｃｏ；ＨｉｇｈＰｕｒｉｔｙＧｒａｄｅ；纯度９９０％ 会随着甜高粱生长或存储时间的变化而变化。甜高 以上）、紫外分光光度计、高效液相色谱（ＨＰＬＣ，日 粱糖分测定包括还原糖和总糖测定，测定方法主要 本岛津），浓盐酸（北京化工），氢氧化钠（ＡＲ，国药 包括ＨＰＬＣ法和ＤＮＳ法。其中，ＨＰＬＣ法是基于液