菌种质量鉴定与保藏.pptVIP

2.梯度稀释点样法 用同样的方法制成浓度较高的孢子悬浊液。同时取灭菌过 的空试管数根，排序编号。按无菌操作规程获得一系列的 不同浓度梯度的孢子悬浮液。再用毛细管在各个梯度孢子 液中取样培养，单孢萌发后菌丝便长入小培养基块中，再 将其转移到试管斜面上培养获得单孢培养物。 第四节 育种技术 一、杂交育种的原理 食、药用菌的杂交是指不同种或种内不同株系之 间的交配，后者则理重要。 二、杂交育种的方法 1.选择亲本： 2.单孢子分离 3.单孢子杂交配对 4.转管繁殖 将可亲和的组合移入新的斜面保存备用。 四极性的异宗结合的食用菌，由于自交不育，经配 对后，凡出现双核菌丝的组合，并能正常结实者，即证 明杂交成功。 次级同宗结合食用菌（如双孢蘑菇），首先经过单孢 子分离、培养，获取不孕菌丝。随后进行不孕性菌丝间的 配对。 5.初次筛选 经过初步筛选，淘汰大部分表现一般的菌株。 经初筛后再做出菇试验比较，选出优良菌株。 6.复筛 通过栽培比较，选出少数性能优良的菌株。出菇鉴定包 括如下几个方面： ①菌丝生长速度： ②出菇菌块（袋）的表型特征： ③子实体表型特征： ④测定其最适生长温度、湿度等。 ⑤计算子实体的产量 。 8.大面各示范推广： 逐步扩大栽培面积，进行示范性的推广，将种性 优良、优质高产的菌株逐渐定为当家菌株。 9.为确定保留下来的杂交新品种正式定名，并申 请有关部门批准。 细胞工程重点研究和开发的是细胞融合技术和细胞 培养技术。细胞融合技术是人们按照需要，使两个 不同遗传特性的细胞，融合成一个新的杂种细胞， 从而人工构建新型细胞，这个细胞兼有两个亲代细 胞的遗传特性。 细胞工程在食用菌育种中的应用 食用菌选种育种技术 第一节 食用菌的繁殖方式 第二节 食用菌的生活史 第三节 选种技术 第四节 育种技术 教学目标：掌握常规菌种筛选技术；掌握孢 子分离技术；基本掌握诱变育种和细胞质融 合育种技术。 教学重点： 组织分离技术、孢子分离技术 食用菌的繁殖方式共有三种，即无性繁殖、 有性繁殖和准性繁殖。 第一节 食用菌的繁殖方式 一、无性繁殖 不通过有性生殖细胞的结合，而由亲代直接产和新个体的生殖方式叫无性繁殖，食用菌的无性繁殖主要有以下几种形式： 1.可以菌丝断裂的方式繁殖： 2.以产和无性孢子的方式繁殖：如香菇产生节孢子，双孢蘑菇产生次生孢子，草菇产生厚垣孢子，黑木耳产生钩状分生孢子等。 3.以出芽方式繁殖： 二、有性繁殖 通过有性生殖细胞的结合，产生新个体的繁殖方式，叫有性繁殖。 孢子核基因的不同就决定了其所萌发成的单核菌丝的不同性别。有性繁殖根据进行质配的单核菌丝的性别，又可以分为以下两种形式。 （一）同宗结合： 1.初级同宗结合 由单个孢子萌发而形成的菌丝全，无需亲和性，很快发展成双核菌比体，并通过锁状联合增殖。每个细胞内的两个核没有遗传上的差别，均能形成子实体。 2.次级同宗结合 减数分裂后4个子核，“雌雄”两两相配分别通过孢子梗（小梗）进入孢子，形成2个含有异核的孢子。这种担孢子一旦萌发，初期为多核，随之产生隔膜，将每一个细胞分隔成只含有2个核的细胞。顶端细胞核又不断再进行分裂，到一定程度又再被横隔成每一细胞内只含有2个核的菌丝，周而复始。这种双核菌丝具有结实性，称之为次级同宗结合。 （二）异宗结合 异宗结合是一种“雌雄不同株”自身不孕的有性生殖方式。在担子菌亚门中，异宗结合占90%，主要有两种形式。 1.二极性异宗结合 一部分食用菌的单核菌丝有“雌”、“雄”之分，通常用“＋”、“－”表示。唯有两条性别不同的菌丝进行交配产生的双核菌丝，才具有结实性。 2.四极性异宗结合 由同一子实体所产生的担孢子萌发的菌丝间进行交配时，唯有1/4的交配组合能产生可孕的双核菌丝。 第二节 食用菌的生活史 食用菌的生活史，是指从孢子萌发，经历菌丝体、子实体阶段，直到产生第二代即同一种孢子的全过程。 一、伞菌的生活史 1.担孢子萌发 2.单核菌丝（初生菌丝）开始发育。 3.两条可亲和的单核菌丝进行质配。 4.质配形成异核的双核菌丝。多数种类的双核菌丝可见锁状联合， 一、伞菌的生活史 5.在适宜的环境条件下，双核菌丝体组织化，开成各种食用菌所特有的子实体。 6.来自两个亲本的一对交配型不同的单倍体核在担子中融合，进行核配，形成一个双倍体核。 7.双倍体核进行减数分裂，结果产生四个单倍体核，原担子变成担子。 8.各个单倍体核分别移支担子小梗的顶端，形成担孢子。至此，一个完整的生活史结束了。 二、有性生殖过程中细胞核的变化 一是质配后开