实验四脾淋巴细胞分离 演示文稿.ppt

实验四：小鼠脾脏单个核细胞的分离 熟悉细胞分离的基本原理 掌握小鼠脾脏单个核细胞的分离 免疫细胞分离方法： 根据不同免疫细胞表面标志: MACS，FACS 根据细胞理化性质： 1）根据细胞比重差异：自然沉降法、密度梯度离心法、改变细胞密度法 2）根据细胞黏附特性：B细胞黏附于尼龙棉 3）根据细胞对渗透压变化的敏感度：红细胞对低渗敏感 基本概念 磁性微珠是20世纪80年代初以高分子材料和金属离子（如Fe3O4）为原料聚合而成的一种以金属离子为核心、外层均匀地包裹高分子聚合体的固相微粒。 以磁性微珠为载体，包被上针对某种细胞表面抗原的特异性抗体即可制成免疫磁性微珠。 MACS 流式细胞仪（flow cytometer）是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置，由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物，因此，用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪（fluorescence activated cell sorter, FACS）,是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。 人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell PBMC)包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形状和比重与其他细胞不同，利用密度在1.077±0.001g/L之间近于