实验二对流免疫电泳.ppt

对流免疫电泳 实验二 抗原抗体反应类型 凝集反应 沉淀反应 颗粒性抗原（如红细胞、细菌、螺旋体等）在适当的电解质存在条件下与相应抗体发生结合，并形成肉眼可见的凝集现象。细菌鉴定分型、ABO血型鉴定 适当电解质存在条件下，可溶性抗原与相应抗体结合，当两者比例适当（等价带）时，可出现肉眼可见的沉淀现象。 沉淀反应 液体内沉淀反应 凝胶内沉淀反应 （反应介质不同） 可溶性复合物 可溶性复合物 沉淀 将一定量的抗体（或抗原）混合于琼脂中，待琼脂凝固后打孔并加入抗原（或抗体），孔中的抗原（或抗体），向四周扩散（浓度又高到低），在抗原与抗体的比例合适处（等价点）呈现白色的沉淀环 沉淀环的大小与抗原（或抗体）的浓度成正比，定量检测抗原或抗体 单向琼脂扩散试验: 沉淀环直径与抗原浓度有关 双向琼脂扩散试验 将抗原和抗体分别加入琼脂对应的孔中，二者会向四周扩散，在二者比例合适处形成白色沉淀线。 对流免疫电泳（CIEP） 双向琼脂扩散与电泳分析的结合产物 加速、灵敏度是双相扩散10?20倍 在琼脂糖凝胶平板的两个孔中分别加入抗原和抗体，抗体侧连接电源正极。电场作用下，抗原抗体定向移动，两者相遇时形成白色沉淀线 可用于检测抗原， 但敏感性较低 琼脂 pH 8.6 对流免疫电泳 等电点与电场力 蛋白质带有氨基团和羧基团，在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子（-NH3+)和阴离子（