THBS1表达上调对肺腺癌细胞增殖、凋亡和细胞周期影响.PDFVIP

·７３０· 郑州大学学报（医学版）　２０１８年 １１月　第５３卷　第６期 ｄｏｉ：１０．１３７０５／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１６８２５．２０１８．０４．０８８ ＴＨＢＳ１表达上调对肺腺癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响 １） １） １） １） １） １） １） ２） 王晓慧 ，刁长英 ，谢艺林 ，刘亚清 ，高献争 ，韩　静 ，李晟磊 ，刘红涛 １）郑州大学第一附属医院病理科 郑州 ４５００５２　２）郑州大学生命科学院细胞生物学研究室 郑州 ４５０００１ 关键词　血小板凝血酶 １；肺腺癌；细胞增殖；细胞凋亡；细胞周期 中图分类号　Ｒ７３４．２ 摘要　目的：探讨血小板凝血酶蛋白１（ＴＨＢＳ１）表达上调对肺腺癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法： 采用实时荧光定量 ＰＣＲ检测肺腺癌细胞株 Ａ５４９、Ｈ１２９９、Ｈ３５８、Ｈ１９７５、ＰＣ９、ＰＧ４９和 Ｃａｌｕ３中ＴＨＢＳ１ｍＲＮＡ的表达 量；构建真核表达载体 ｐｃＤＮＡ３．１ＴＨＢＳ１，以脂质体转染至ＴＨＢＳ１ｍＲＮＡ表达量最低的Ｈ１９７５细胞中，实时荧光定 量 ＰＣＲ检测 ＴＨＢＳ１ｍＲＮＡ表达水平，ＣＣＫ８法检测细胞增殖能力，流式细胞技术分析细胞凋亡及细胞周期分布情 况。以未转染和转染空质粒 ｐｃＤＮＡ３．１的Ｈ１９７５细胞作对照。结果：不同肺腺癌细胞株中ＴＨＢＳ１ｍＲＮＡ表达量不 同，Ｈ１９７５细胞中表达最低。与未转染和转染空质粒的 Ｈ１９７５细胞比较，转染 ｐｃＤＮＡ３．１ＴＨＢＳ１的 Ｈ１９７５细胞 ＴＨＢＳ１ｍＲＮＡ表达上调（Ｐ＜０．０５），细胞增殖能力增强（Ｐ＜０．０５），细胞凋亡率降低（Ｐ＜０．０５），细胞周期进程被促 进（Ｐ＜０．０５）。结论：ＴＨＢＳ１与肺腺癌细胞的生物学行为关系密切，有可能成为肺腺癌的治疗靶点。 ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＴＨＢＳ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄ ｃｅｌｌｃｙｃｌｅｏｆｌｕｎｇａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓ １） １） １） １） １） １） ＷＡＮＧＸｉａｏｈｕｉ，ＤＩＡＯＣｈａｎｇｙｉｎｇ ，ＸＩＥＹｉｌｉｎ ，ＬＩＵＹａｑｉｎｇ ，ＧＡＯＸｉａｎｚｈｅｎｇ ，ＨＡＮＪｉｎｇ ，ＬＩ １） ２） Ｓｈｅｎｇｌｅｉ，ＬＩＵＨｏｎｇｔａｏ １）ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＺｈｅｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００５２ ２）ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＺｈｅｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００１ Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ１；ｌｕｎｇａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ；ｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；ｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ；ｃｅｌｌｃｙｃｌｅ Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ａｉｍ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ１（ＴＨＢＳ１）ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ａｐ ｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｃｅｌｌｃｙｃｌｅｏｆｌｕｎｇａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＴＨＢＳ１ｍＲＮＡｉｎｌｕｎｇａｄｅｎｏｃａｒｃｉ ｎｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅｓＡ５４９，Ｈ１２９９，Ｈ３５８，Ｈ１９７５，ＰＣ９，ＰＧ４９ａｎｄＣａｌｕ３ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｒｅａｌｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ（ｑＲＴ ＰＣＲ）．ＥｕｋａｒｙｏｔｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒｐｃＤＮＡ３．１ＴＨＢＳ１ｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄａｎｄｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｉｎｔｏＨ１９７５ｃｅｌｌｓｂｙｌｉｐｏｓｏｍｅｓ． ｑＲＴＰＣＲｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ