核酸降解与核苷酸代谢过程.pptVIP

第十章 核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 第一节 核酸的酶促降解 第二节 核苷酸的生物降解 第三节 核苷酸的生物合成 第一节 核酸的酶促降解 核酸酶实质是磷酸二脂酶。 根据酶对底物的专一性分为：核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶、非特异性核酸酶。 根据酶的作用方式分：内切酶、外切酶。 只能水解DNA磷酸二酯键的酶。 牛胰脱氧核糖核酸酶（DNaseⅠ），可切割双链和单链DNA，降解产物为3’-磷酸为末端的寡核苷酸。 限制性核酸内切酶：细菌体内能识别并水解外源双源DNA的核酸内切酶，可特异切割外源DNA特定序列中的磷酸二脂键(对碱基序列专一），切断双键，常作为工具酶。? 限制性内切酶类型 限制性内切酶的命名和意义 既可水解RNA，又可水解DNA磷酸二酯键的核酸酶。 小球菌核酸酶（内切酶），可作用于RNA或变性的DNA，产生3’-核苷酸或寡核苷酸。 蛇毒磷酸二酯酶和牛脾磷酸二酯酶（外切酶）。 一、核苷酸的降解 一、核苷酸的降解 1、 核苷酸酶 （磷酸单脂酶） 水解核苷酸，产生核苷和磷酸。 2、核苷磷酸化酶 广泛存在，反应可逆 不同生物降解的产物不同 第三节 核苷酸的生物合成 （1）嘌呤环上各原子的来源 IMP的合成是从5-磷酸核糖开始的，先于ATP反应生成5’-磷酸核糖-1’-焦磷酸（PRPP），然后嘌呤环的各原子在PRPP的C-1位置上逐渐加上去。 （3）IMP转变为GMP和AMP 腺嘌呤在核苷磷酸化酶作用下转化为腺嘌呤核苷，后者在腺苷激酶的作用下与ATP反应，生成腺嘌呤核苷酸。 与嘌呤核苷酸合成不同，在合成嘧啶核苷酸时，首先合成嘧啶环，再与磷酸核糖结合，生成尿嘧啶核苷酸，最后由尿嘧啶核苷酸转化为胞嘧啶核苷酸。 （1）嘧啶环上各原子的来源 尿嘧啶核苷三磷酸可直接与NH3（细菌）或Gln（动物）反应，生成胞嘧啶核苷三磷酸。 嘧啶碱与1-磷酸核糖生成嘧啶核苷，然后由尿苷激酶催化尿苷和胞苷形成UMP和CMP。 脱氧核糖核苷酸是由相应的核糖核苷酸衍生而来的。 （1）核糖核苷酸的还原反应 由尿嘧啶脱氧核苷酸（dUMP）经甲基化生成。Ser提供甲基，NADPH提供还原当量。 四氢叶酸是一碳的载体，参与嘌呤核苷酸和胸腺嘧啶脱氧核苷酸的合成。 氨基蝶呤、氨甲蝶呤是叶酸的类似物，能与二氢叶酸还原酶不可逆结合，阻止FH4的生成，从而抑制FH4参与的一碳单位的转移。可用于抗肿瘤。 三、? 核苷酸合成总结 一、名词解释 酰氨平面、别构效应、结构域、 主动运输、辅基、Tm 二、简答 1、简述蛋白质含量测定的3种方法及原理 2、比较蛋白质α-螺旋中的氢键和DNA双螺旋中的氢键，并指出氢键在稳定这两种结构中的作用。 3、DNA双螺旋一条链序列是GGATCGAAC,请写出其互补链序列。 嘧啶碱 + 1-磷酸核糖 核苷磷酸化酶 嘧啶核苷 + Pi 尿苷（胞苷） + ATP 尿苷激酶／Mg2+ UMP（CMP） + ADP （2）磷酸核糖转移酶途径（胞嘧啶不行） 尿嘧啶磷酸核糖转移酶 尿嘧啶 + 5-PRPP UMP + PPi 2、? 补救途径 （1）?嘧啶核苷激酶途径（重要途径） 三、脱氧核苷酸的合成 NADP+ NADPH+H+ 硫氧还蛋白还原酶 FAD 核糖核苷酸还原酶（B1和B2） ATP 、Mg2+ 硫氧还蛋白（还原型） SH SH 硫氧还蛋白（氧化型） S S O P-P-CH2 N OH OH 核糖核苷二磷酸 O P-P-CH2 N OH H + H2O 脱氧核糖核苷二磷酸 ADP、GDP、CDP、UDP 腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶核糖核苷酸经还原，将核糖第二位碳原子的氧脱去，即成为相应的脱氧核糖核苷酸。 还原反应一般在核苷二磷酸（NDP）水平上进行 （2）胸腺嘧啶脱氧核苷酸的合成 H 胸腺嘧啶核苷酸合成酶 dUMP + N5,N10-亚甲基THFA dTMP + 二氢叶酸 二氢叶酸还原酶 7，8-二氢叶酸 + NADPH + H+ 5，6，7，8-THFA + NDAP+ Ser羟甲基转移酶 Ser + THFA Gly+N5,N10-亚甲基THFA+H2O * * 核酸酶 核酸 核苷酸 3’、5’-磷酸二酯键 一、?? 核糖核酸酶 只水解RNA磷酸二酯键的酶（RNase），不同的 RNase专一性不同。 牛胰核糖核酸酶I（RNaseI），作用位点是嘧啶核苷-3’-磷酸与其它核苷酸间的连接键。 （内切核酸酶） 核糖核酸酶T1（RNaseT1），作用位点是3’ -鸟苷酸与其它核苷酸的5’-OH间的键。（内切核酸酶） 5′ p p p p OH Py Pu Py Pu